分离培养了人牙周膜细胞,一定浓度的HMGB1可使牙周膜细胞中的RANKL/OPG比值增高,还会诱导炎症因子IL-6 mRNA表达上调,首次发现FHL2与人牙周膜细胞的体外矿化过程相关。采用stro-1作为标志物,利用免疫磁珠正选法筛选了人牙周膜干细胞,检测了不同浓度的TNF-α对人牙周膜干细胞和小鼠骨髓间充质干细胞ST2增殖和碱性磷酸酶活性的影响;检测了TNF-α对牙周膜干细胞和ST2细胞成骨基因BMP2、OC、BSP、ALP、RUNX2、OSTERIX的影响。采用逆转录病毒pbabe-puro-IкBα成功转染ST2细胞,构建了NF-кB p50,p65真核表达载体并转染ST2细胞,比较了阻断NF-кB通路后施加炎性刺激TNF-α后ST2细胞增殖及矿化成骨的改变,并比较过表达NF-кB后ST2细胞矿化及成骨基因BMP2、OC、ALP、RUNX2、OSTERIX的变化。ST2细胞转染sbe-luc质粒和空载体质粒后分别施加TNF-α和BMP-2进行刺激,比较其变化;建立小鼠下颌骨缺损模型,观察了阻断NF-кB通路的骨髓基质细胞植入后施加炎性刺激对颅骨缺损修复和成骨基因的影响。
英文主题词stem cells;NF-кB;proinflammatory cytokines;bone formation