中文摘要：

绿僵菌是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌，孢子耐热性差限制了其商品化程度和大田应用效率。然而，关于绿僵菌及其他生防真菌孢子耐热的分子机理，至今仍不甚明确。本项目以虫生真菌模式生物金龟子绿僵菌为研究对象，从分子水平上探讨该菌孢子高温胁迫响应的机制。首先，实验拟将绿僵菌孢子以38℃热胁迫处理2 h，运用定量蛋白质组技术（iTRAQ）分析高温胁迫下绿僵菌孢子与正常培养孢子（作为对照组）的蛋白质组表达谱，并筛选出绿僵菌孢子中耐高温胁迫相关的差异表达蛋白，同时利用实时荧光定量PCR和Western 技术进行耐高温特异蛋白表达的验证；其次，结合生物信息学网络分析，进一步确认孢子中耐高温胁迫的特异蛋白及其相应基因所参与的生物学通路；最后，利用基因过表达和沉默等实验手段对关键蛋白分子进行生物学功能验证。该项目的实施将为阐明绿僵菌孢子耐热的分子机理和通过分子设计创制耐热工程菌株提供重要的理论基础。