新疆维吾尔族妇女中宫颈癌发病率高,发病年龄趋于年轻化。本研究以新疆地区的诱发宫颈癌的HPV16致瘤基因为靶基因制备HPV16相关性预防和治疗性核酸疫苗,从细胞和个体的水平观察导入基因的表达水平及其诱导的保护性免疫应答。宫颈癌组织PCR扩增HPV16E7E6基因和鉴定, PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16 E6阳性率为82.35%,HPV16 E7阳性率为70.59%;对HPV16E7E6基因一级结构顺序进行的分析结果显示了HPV16 E6基因全长为456bp,第247位碱基发生了T?G的突变,并由此引起所编码氨基酸的改变, HPV16 E6的基因结构与德国标准株HPV16E6基因之间存在差异,命名为HPV16 E6新疆株;HPV16 E7基因全长297 bp,与德国标准株一致,未发生突变。构建完成了HPV16E7和E6/pCMV4真核重组质粒,获得了HPV16E7和E6的真核表达载体,作为DNA疫苗免疫小鼠诱导了相应抗体的产生。
cervical cancer ,human papillomavirus ,nucleic acid vaccine
本项目主要研究针对宫颈癌的核酸疫苗人乳头瘤病毒16型E7的制备。内容包括1PV16E7新疆株基因的分离与克隆; 2、HPV16E7基因一级结构顺序分析;3、重组质粒PCMV4/HPV16E7在真核细胞的表达;4、重组质粒PCMV4/HPV16E7在小鼠体内的表达。本研究意见在于制备研究HPV16相关性预防和治疗性核酸疫苗,给新疆地区病毒疫苗的研究提供有价值淖柿稀