中文摘要：

葡萄胎(Hydatidiform Mole,HM)是最常见的妇科疾病之一。葡萄胎发病具有种族与地域的差异,提示遗传因素在葡萄胎发病中的重要作用。NLRP7基因是家族性复发性葡萄胎和部分复发性葡萄胎的致病基因, 对少见的复发性葡萄胎病例作NLRP7基因突变检测，不能阐明遗传背景复杂,临床表型丰富的葡萄胎的发病机制。 本研究采用高通量基因型鉴定技术SNPstream分析NLRP7基因的一些标签SNP位点在中国人种葡萄胎患者和正常生育结局的中国妇女群体中的频率差异，筛选出与中国人种葡萄胎关联的NLRP7基因的SNP位点和NLRP7基因突变的共同位点。其次在细胞与生化水平评估NLRP7基因的SNP是否会影响NLRP7基因功能,进一步探讨NALP7基因在葡萄胎发生的作用机制。本研究旨在发现中国人种葡萄胎高发的关键点,为找到方便简洁价格低廉的诊断分子标志,为后续的相关防治提供实验依据。

结论摘要：

项目完成较好。第一部分测序比对分析对35例中国人种复发性生育结局不良者及60例正常对照行NLRP7基因突变筛选，3个患者及其父母在30个SNP点行单体型分析。发现7例NLRP7基因双位点变异（20%），4例NLRP7基因单位点变异（11.4%），24例无NLRP7基因变异（68.6%）；3个突变位点K379N，R432X和L825X在2个无关联的家系缘自共同的祖先。推论NLRP7基因不是中国人种复发性生育结局不良的主要相关基因；中国人种在3个突变位点K379N，R432X和L825X源自共同的祖先；第二部分测序比对分析对303例中国人种妊娠滋养细胞疾病患者及300例正常对照行NLRP7基因突变筛查。发现35例携带19个不同的NLRP7基因变异点。156例妊娠滋养细胞肿瘤患者，19例携带NLRP7基因杂合子突变 (12.18%); 147例葡萄胎患者，16例携带NLRP7基因杂合子突变 (10.88%);300例对照者发现5 个NLRP7基因变异点。推论10个变异点可能与葡萄胎致病相关。第三部分9例复发性妊娠结局不良者的葡萄胎组织行基因分型，其中5例接受辅助生育技术对其生育结局进行关联分析。发现2例NLRP7基因单位点突变者和4例无NLRP7基因突变者的葡萄胎是二倍体父系来源完全性葡萄胎，3例NLRP7基因双位点突变的葡萄胎是二倍体双亲来源完全性葡萄胎。3例NLRP7基因双位点突变的患者接受辅助生育技术后均失败，两例NLRP7基因单位点突变的患者接受辅助生育技术后其中一例已孕六个月。推论NLRP7基因单位点突变者接受辅助生育技术，比双位点突变者可有更好的生育结局。第四部分提取7例葡萄胎患者，8例妊娠滋养细胞肿瘤患者及15例对照者的外周血淋巴细胞，细胞培养，LPS刺激，收集上清，ellesa法测定IL-1B因子分泌，western blot 法测定NLRP7，casepase-1及pro-IL-1B蛋白的表达。发现实验组IL-1B因子分泌低于对照组；3例有NLRP7基因突变者与对照组相比，IL-1B因子分泌明显降低，casepase-1蛋白低表达，pro-IL-1B蛋白的表达无差异。推论NLRP7基因突变抑制casepase-1依赖的IL-1B因子的分泌。发表SCI IF 3.8文章1篇，另2篇SCI文章已录用，国内核心期刊3篇。培养研究生4人。申请专利1项。