中文摘要：

我们前期研究发现，小鼠自发耐受的移植肝脏中CD25+FoxP3+T细胞明显增多，并伴随大量浸润T细胞凋亡，同时发现肝星状细胞（HpSC）具有体外诱导CD25+FoxP3+T细胞扩增以及使活化T细胞凋亡的功能。因此推测HpSC在肝移植免疫耐受中发挥重要作用。本课题利用小鼠肝移植自发耐受模型，CFSE荧光示踪分析受体体内T细胞对同种抗原识别、活化增殖能力及效应T细胞成熟状况；分离纯化HpSC，研究其对初始型和活化型T细胞不同的免疫功能；然后，研究HpSC是否通过B7-H1/PD-1通路实现对CD25+FoxP3+T细胞诱导扩增以及对浸润效应T细胞凋亡诱导的调控；最后，体内经B7-H1抗体阻断和HpSC过继输注等手段分析基于B7-H1/PD-1通路的HpSC免疫调节特性与肝移植自发耐受的相关性，以期发现HpSC新的免疫功能及其分子基础，进而揭示HpSC等非实质细胞在肝移植免疫耐受中的作用。

结论摘要：

本项目以肝星状细胞（HpSC）为研究对象，调节性T细胞产生和效应性T细胞凋亡为切入点，阐述HpSC和B7-H1分子在小鼠肝移植免疫耐受中的作用。本项目经过三年研究，较好完成了研究内容，达到了预期目的。主要研究结果综述如下（1）建立了供体C57BL/6J小鼠至受体C3H小鼠较为稳定的肝移植模型，术后小鼠存活时间可达60天以上。（2）阐明肝移植术后长期存活小鼠体内淋巴细胞抗原识别、活化增殖和效应产生等免疫功能仍然存在我们将CFSE标记的受体T细胞输入同种肝移植术后长期存活小鼠体内，发现受体淋巴细胞存在活化增殖现象，同时表达较高水平IFN-γ，而且移植小鼠体内免疫系统对同种抗原存在细胞毒性T细胞杀伤效应。（3）活化的HpSC（aHSC）能诱导产生CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞，后者具有非特异免疫抑制功能aHSC能刺激同种T细胞增殖反应，促使T细胞产生IL-2、IL-5、IL-10等因子，并高表达FoxP3mRNA。流式检测证明，aHSC能选择性扩增出CD4+CD25+FoxP3+T细胞（占14.8%，对照组为2.4%），后者能显著抑制同种抗原和第三方抗原刺激的淋巴细胞增殖反应，表明aHSC选择性扩增的CD4+CD25+T细胞为Treg细胞。aHSC体内输注同样促进小鼠CD4+CD25+FoxP3+ T细胞的扩增。抗体阻断试验显示，aHSC诱导Treg细胞的功能与B7-H1、IL-10、TGF-β等分子无关，而与IL-2有关。（4）aHSC对CD8+T细胞凋亡具有明显促进作用，并依赖于B7-H1分子B7-H1阻断后，HSC对T细胞凋亡的诱导作用明显减弱。（5）B7-H1介导了小鼠移植肝浸润T淋巴细胞的凋亡，并影响肝移植小鼠的长期存活时间小鼠肝移植术后早期移植肝中CD8+T细胞浸润明显，随着存活时间延长，移植肝浸润的CD8+T细胞明显减少。将B7-H1基因敲除小鼠进行肝移植，移植肝中浸润CD8+T细胞的凋亡明显减少，同时术后存活时间显著降低。综合以上结果，我们认为，在多种细胞、多类分子组成的肝移植免疫复杂体系中，HpSC选择性扩增CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞以及促进移植物浸润CD8+T细胞凋亡的作用，在肝移植免疫耐受形成中发挥重要作用。本项目目前在SCI收录的期刊上发表相关论文4篇（标注项目编号）。培养博士研究生2名。