中文摘要：

化疗耐药是造成急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿死亡的重要原因。癌基因MDM2在儿童ALL中高表达，抑制ALL细胞凋亡，进而产生化疗耐药。MDM2高表达的儿童ALL治疗难度大、死亡率高、预后差，临床上属于难治性ALL。若抑制MDM2表达，则可恢复ALL细胞对凋亡敏感性。我们发现小檗碱(BBR)可特异性抑制ALL细胞MDM2表达，通过p53依赖的MDM2功能，诱导细胞凋亡（已发表于Cancer Res）。此外，BBR作为MDM2抑制剂，还可通过p53非依赖的MDM2功能，诱导细胞凋亡。本项目设计从临床病例、ALL细胞及动物模型三个层次，采用SiRNA，Western-blot，Real-time PCR，流式细胞和激光共聚焦等技术，重点探讨BBR通过p53非依赖的MDM2-XIAP功能，诱导ALL细胞凋亡的分子机制，为BBR在临床难治性ALL靶向治疗中的作用及临床应用提供理论和实验依据。

结论摘要：

小檗碱在体内外均表现出很强的抗肿瘤活性，但其具体分子机制目前尚不明确。该研究主要探讨小檗碱诱导急性淋巴细胞白血病凋细胞亡的p53非依赖的分子机制。方法该研究采用p53阴性的急性淋巴细胞白血病细胞系 EU-4作为研究模型。用小檗碱处理上述细胞后，通过不同方法检测细胞活性及凋亡。Western blot 和 PCR 方法被用于检测凋亡相关蛋白XIAP和MDM2的表达。用小分子干扰(siRNA)方法敲低内源性XIAP和MDM2的表达。结果 小檗碱在翻译水平抑制XIAP表达，导致 XIAP对caspase抑制作用解除，从而诱导ALL细胞凋亡（非p53依赖的MDM2-XIAP途径）。小檗碱能抑制XIAP蛋白表达，该作用呈出较好的时间及浓度依赖性。小檗碱通过蛋白酶体依赖途径抑制癌基因MDM2表达，及癌基因XIAP蛋白表达下降。通过小分子干扰(siRNA)方法敲低内源性XIAP表达后，可增强阿霉素对白血病细胞的凋亡诱导作用。结论我们的研究结果揭示了小檗碱诱导白血病细胞凋亡新的p53非依赖的分子机制。小檗碱有望成为难治性p53阴性ALL治疗的靶向治疗药物。