中文摘要：

急性冠脉综合征的发生与不稳定斑块形成密切相关，导致斑块不稳定的主要原因是斑块内脂质含量增多，其中巨噬细胞和血管平滑肌细胞（VSMC）泡沫化对脂质含量发挥重要作用。目前对巨噬细胞泡沫化有较多了解，对VSMC泡沫化机制知之甚少。已知调节VSMC脂质生成的关键分子为低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (LRP1)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)，钙信号对两者均有一定调控作用。最近我们研究发现一种新的非选择性阳离子通道TRPV1能增加VSMC钙浓度、减少脂质生成，激动TRPV1可减少斑块形成。因此我们设想TRPV1可能通过改变钙信号调控LRP1和ABCA1功能，减少VSMC对胆固醇摄取并促进胆固醇转出，从而抑制VSMC泡沫化形成。为证实上述假设，我们拟紧扣VSMC内钙信号及胆固醇动态平衡变化，从多层次研究激动TRPV1调控VSMC泡沫化的分子机制，为临床开发新型抗AS药物提供理论依据。

结论摘要：

我们按照课题研究计划，以TRPV1调控平滑肌细胞(VSMC)泡沫化的分子机制为核心，以ApoE-/-和TRPV1-/-ApoE-/-小鼠及原代培养的C57BL/6J和TRPV1-/-小鼠VSMC为研究对象，在整体和离体水平对激活TRPV1抗动脉粥样硬化作用进行了系列研究。取得的重要研究成果如下 1. 证实了TRPV1在小鼠主动脉和VSMC中均有表达；TRPV1激动剂可呈浓度依赖性地引起的VSMC内游离钙离子浓度增加；TRPV1激动剂可上调TRPV1表达，这表明主动脉和VSMC中存在TRPV1通道的功能性表达。 2. 阐明了激活TRPV1可降低小鼠血清中的炎症因子、总胆固醇和甘油三酯水平，减少VSMC内脂质聚集及减少高脂饮食诱导的小鼠主动脉的AS斑块形成；而TRPV1基因敲除后上述指标均有不同程度的加重，提示TRPV1参与调节AS形成。 3. 证实了激活TRPV1可上调VSMC三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达，下调低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (LRP1)表达，同时显著下调多种炎症因子(MCP1、TNF-α、CRP)及粘附分子(P-selectin、 VCAM-1、ICAM-1)表达，这提示TRPV1激活通过减少VSMC对胆固醇的摄取并促进胆固醇的转出，抑制炎症反应，减少VSMC泡沫化。 4. 揭示了激活TRPV1可上调VSMC钙调神经磷酸酶 (Calcineurin) 和蛋白激酶A (PKA)；钙螯合剂、Calcineurin和PKA阻断剂可逆转TRPV1对ABCA1和LRP1表达的调控作用，提示Ca2+激活的Calcineurin和PKA依赖机制是TRPV1调控ABCA1和LRP1功能，发挥抗动脉粥样硬化作用的信号机制。 5. TRPA1与TRPV1密切相关，TRPA1调节TRPV1活性、增加TRPV1磷酸化和通道电流强度。申请人在比利时鲁汶大学离子通道研究室工作期间，采用膜片钳技术探讨了TRPA1的电生理特征，并发现2种新的TRPA1调节剂藁苯内酯和伞形花酮。本研究结果在Cardiovasc Res 2011和Pflugers Arch 2011杂志发表SCI论著3篇，总影响因子14.99；以此为基础，成功获批2012年度NSFC青年-面上连续资助项目1项；国内会议特邀报告2次；国外研究机构学习交流1次；培养博士研究生1名。