中文摘要：

哮喘是多种细胞及细胞因子参与的慢性气道炎症，嗜酸性粒细胞是其关键效应细胞，可通过白介素(IL)-5依赖及非依赖机制在肺部聚集。IL-13通过IL-5非依赖途径引起肺部Eos聚集，并通过气道上皮细胞及平滑肌细胞等参与哮喘发病。IL-4突变体可以阻断IL-13及IL-4的作用。本研究拟以杆状病毒昆虫表达系统克隆表达小鼠IL-5可溶性受体蛋白（sIL-5Rα）及IL-4突变体（Q116D，Y119D）蛋白，纯化鉴定后，通过单用及联用sIL-5Rα、IL-4突变体治疗哮喘小鼠模型，观察其对哮喘小鼠肺功能及气道反应性的影响，同时测定支气管肺泡灌洗液及外周血中嗜酸性粒细胞数量、活性及凋亡的变化，并对血清中IL-5、IL-13、IL-4及特异性IgE等进行检测，以了解联合sIL-5Rα及IL-4突变体对哮喘动物气道炎症及气道高反应性的影响，探讨其在哮喘发病中的作用，为临床应用奠定基础。

结论摘要：

目前认为哮喘的主要机制是TH2占优势的适应性免疫应答和先天淋巴细胞（ILC2）为主的固有免疫应答反应，分泌IL-4/IL-5/IL-13引发气道慢性炎症的发生。本课题旨在克隆表达并纯化高活性的IL-5可溶性受体α蛋白（sIL-5Rα）及IL-4突变体(Q116D, Y119D)蛋白，并应用于哮喘小鼠模型，观察哮喘小鼠气道炎症、BHR及气道重塑的影响。我们主要的实验结果有（1）利用杆状病毒昆虫系统克隆表达并纯化sIL-5Rα及IL-4MT蛋白；（2）联合应用sIL-5Rα及IL-4MT蛋白作用哮喘小鼠模型①可显著改善哮喘小鼠肺部病理损害;②可明显减少哮喘小鼠BALF中白细胞数目及EOS百分比, 增加EOS在肺部的凋亡率；③可明显降低哮喘小鼠IL-5、Eotaxin、IgE水平④可明显缓解气道高反应性。这些实验结果充分表明了联合sIL-5Rα及IL-4MT能通过减少哮喘小鼠炎症因子水平及炎症细胞数，降低气道反应性来缓解哮喘气道炎症。