中文摘要：

异麦芽低聚糖广泛应用于食品医药饲料化工等行业中，我们研究发现的M-1菌株的a-葡萄糖苷酶其催化专一性特强，能将底物转化生成异麦芽低聚糖含量高达90%，而现有各种来源的a-葡萄糖苷酶仅能转化生成50～60%含量的异麦芽低聚糖，我们拟开展该酶的分离纯化及酶学特性研究，探讨该酶专一性强的催化机理。该研究在学术和应用上都具有重要意义。

结论摘要：

本研究以黑曲霉M-1为出发菌株，对α-葡萄糖转苷酶的产酶影响因素、纯化、酶学性质以及功能基团进行系统的研究，通过对影响黑曲霉M-1产α-葡萄糖转苷酶的各种因素的分析以及产酶条件的正交优化，确定了最佳的发酵培养基，添加0.1mmol/L的酶作用底物甲基-α-D-葡萄糖苷对产酶的诱导作用最大。通过硫酸铵分级分离，离交、亲和、分子筛柱层析，制备PAGE等，从黑曲霉M-1分离纯化出α-葡萄糖转苷酶，分子量为110kDa。该酶的最适pH值为6.0，温度在小于60℃稳定；Km值为4.32mmol/L，低浓度的Ca2+、Mg2+对酶有激活作用，而Cu2+ 、 Ag+ 、Fe2+则表现为抑制作用。该酶α-葡萄糖转苷酶N-末端氨基酸序列测定为N-SVPGTEYVV-9；化学修饰剂选择修饰α-葡萄糖转苷酶的氨基酸残基，结果表明pCMB、ME、EDC、ClAc能显著抑制酶的活力，活力的下降与修饰剂的浓度有关，乙酰丙酮、NBS的修饰不表现对酶的抑制作用，因此，推测α-葡萄糖转苷酶的活性中心可能包括半胱氨酸、天冬氨酸（谷氨酸）、组氨酸残基，部分二硫键对保护酶的催化功能也是必需的。