中文摘要：

本项目进展顺利，按期完成了任务书规定的各项研究内容和研究指标。课题组通过截短改造和设计合成，获得了一系列候选膜转运结构域。将这些候选结构域序列与单链抗体和报告基因或杀伤分子进行基因重组，并在体内外进行比较，发现白喉毒素的furin识别序列（Fdt）能在靶细胞的内吞体中被furin蛋白酶高效切割，确定其做为靶向杀伤蛋白的最佳膜转运序列。我们用Fdt序列替换靶向促凋亡蛋白中的毒素膜转运结构域，并在体内外实验中证实了这类新型的靶向促凋亡蛋白能实现在HER2阳性肿瘤细胞内的膜转运，并有效地杀伤肿瘤细胞。研究证实，经furin切割加工后，活性杀伤分子可直接从内吞体转位至胞浆。由于Fdt序列仅含有9个氨基酸残基，不能形成有效的B细胞抗原表位，因此含有该序列的新型靶向促凋亡蛋白的免疫原性被显著降低。 以依靠本项目的支持所获得的上述研究成果为主要基础，课题组获得了"重大新药创制"国家科技重大专项的支持（肿瘤靶向促凋亡蛋白候选药物e23sFv -Fdt-tBid的研究，2009ZX09103），正在进行重组蛋白的中试生产工艺研究，是本项目研究的深入和继续，也是科研成果向临床产品转化的重要环节。