中文摘要：

炎症自限调控障碍导致炎症失控是脓毒症发病的重要机制。脂氧素是炎症"刹车"信号分子，对炎症具有广泛强效的负性调节效应。我们近期发现脓毒症患者白细胞上脂氧素受体ALX表达显著低于健康对照，随后对ALX基因进行测序、突变频率、条件关联及潜在转录因子位点预测等一系列分析提示ALX基因启动子区可影响AP-1结合的点突变（-874G→A）可能是引起ALX低表达并导致脓毒症炎症失控的重要原因。为进一步证实-874G→A突变在脓毒症发病中的作用并揭示相关分子机制，我们拟首先采用染色质免疫共沉淀、荧光素酶报告基因等手段探明G→A突变干扰ALX表达的机制；随后在不同基因型中性粒细胞、转染野生型和突变型ALX基因的U937细胞中探明G→A突变导致炎症反应增强的具体环节及分子机制；最后在动物模型中模拟ALX功能低下状态，观察其对脓毒症发生发展及转归的影响。本项目旨在从炎症自限障碍角度揭示脓毒症发病的新机制。

结论摘要：

ALXR (FPR2) 作为炎症“刹车”信号分子-脂氧素的受体，对炎症具有广泛强效的负性调节效应。FPR2基因所在的FPR基因家族包括FPR1、FPR2/ALXR、FPR3基因，它们均在白细胞的激活、吞噬及炎症介质的释放过程中起重要作用。本研究从全基因的层面，以FPR1、FPR2基因上下游3kb范围为整体，研究FPR基因家族中FPR1、FPR2/ALXR基因单核苷酸多态性位点与创伤后脓毒症的关联。通过连锁不平衡分析的方法，挑选出8个具有代表意义的标签SNP位点。利用Pyrosequencing法分析570例严重创伤患者DNA样本库，关联分析研究表明，携带rs4802859A、rs11666254A突变的严重创伤患者更易并发脓毒症。采用LPS刺激全血，分别分析2个位点碱基突变对靶基因蛋白表达和炎症因子TNF-α、IL-10水平，结果发现rs4802859和rs11666254位点突变均影响靶基因蛋白FPR1、FPR2蛋白表达，携带A位点较G位点靶基因蛋白表达均降低。rs11666254位点碱基变异能显著降低个体对LPS的反应性。G/G基因型个体， IL-10水平均分别高于G/A和A/A个体；而G/G个体TNF-α水平均分别低于G/A和A/A个体。通过PCR和定点突变技术，采用荧光素酶报告分析系统，体外功能分析发现rs4802859和rs11666254位点分别G突变为A，均可减弱FPR2基因启动子活性，有可能为功能性突变。 本研究发现了新的创伤后脓毒症易感性位点rs4802859与rs11666254，其碱基变异可能通过降低启动子活性，可能导致靶基因FPR1、FPR2/ALX低表达，而使创伤后炎症过程中FPR1、FPR2对炎症消退效应降低，致使脓毒症易感。该研究为严重创伤等危重病患者后期感染并发症的防治提供了新的思路。