中文摘要：

本研究针对环境致癌物具有致癌过程复杂、多种痕量污染物同时存在目前缺乏可同时检测DNA损伤与DNA修复功能方法的现状，在本实验室已建立的可用于检测DNA损伤的细胞筛选技术的基础上，根据宿主细胞恢复活性（HCR）试验原理，构建了一种基于双荧光素酶的环境化学物致癌活性的真核细胞快速筛选系统。本研究建立的gadd153-luc检测细胞株可检测DNA损伤，再利用体外受损质粒转染细胞，以海肾荧光素酶为报告基因可检测DNA修复。首先分别以萤火虫荧光素酶或海肾荧光素酶作为报告基因，对不同作用机制的致癌物进行检测，结果表明本系统可单独检测出低浓度致癌物质对细胞的DNA损伤或修复作用，具有灵敏度高和检出率高的特点。在此基础上采用双荧光素酶报告基因同时标记的方法构建重组细胞，同时检测环境污染物对细胞DNA损伤和修复能力的影响。结果表明，通过双荧光素酶报告基因可对DNA损伤和修复作用同时进行检测，检测灵敏度与分别检测DNA损伤和修复基本相同，说明本研究建立的双荧光素酶检测体系具有较高的检测灵敏度和准确性。通过本课题的研究，建立了一种可以同时对环境中低浓度污染物的DNA损伤效应和修复效应进行快速检测的新方法。