成体动物脊髓中存在一定数量的神经干细胞(NSCs),在脊髓损伤后可以大量增殖。然而,这些增殖的细胞大部分向星形胶质细胞分化,参与局部胶质瘢痕的形成。最新的研究提示,海马中存在的Neurogenesin-1(Ng1)蛋白能够明显促进脑源性NSCs向神经元分化。但该蛋白是否能够有效地促进脊髓源性NSCs向神经元分化,未见相关报道。本课题组利用基因克隆技术将Ng1基因成功克隆入真核表达载体,载体命名为pSecTag2/Hygro B-Ng1。将重组载体转染入Cos-7细胞后,Westernblot成功检测到蛋白的表达。随后在体外培养出脊髓源性NSCs,并证实在体外Ng1蛋白能够通过抑制骨形成蛋白-4从而有效地促进脊髓NSCs向神经元分化。随后本课题组制备了大鼠脊髓损伤模型,并通过Alzet微泵分别向实验组和对照组持续转染重组载体和空白载体。自损伤1周起实验组大鼠的BBB评分明显高于对照组;组织学观察实验组脊髓形态恢复良好;免疫学检测示实验组脊髓组织中新分化的神经元细胞数较对照组明显增多,新分化的星形胶质细胞数明显减少。脊髓损伤后Ng1蛋白能够促进NSCs向神经元分化,促进脊髓运动功能的恢复。
英文主题词Neurogenesin-1; cell differentiation; spinal cord injury; neural stem cell;neurogensis