中文摘要：

现已阐明NO-cGMP通路在阴茎勃起中起关键作用，PDE5已成为当前ED基因治疗的分子靶点。有文献报告用PDE5反义基因与脂质体转染人阴茎海绵体平滑肌细胞可增强阴茎勃起。RNAi是最近发展起来的一项新技术，其基因抑制效果比反义基因技术更强、抑制时间更持久，并克服了反义寡脱氧核苷酸易被RNA酶降解而失去作用的缺点。目前国内外尚未见应用siRNA降低PDE5基因表达而用于ED治疗的研究报告。我们拟应用

结论摘要：

现已阐明一氧化氮－环磷酸鸟苷（NO-cGMP）信号通路在阴茎勃起过程中起关键作用，抑制PDE5表达成为治疗ED的最重要策略之一，成为目前开发新药的药物靶点和基因治疗的分子靶点。 RNA干扰是一种通过细胞内导入双链RNA（dsRNA）而导致特异基因表达抑制的转录后基因沉默现象。在哺乳动物细胞中应用短发夹RNA (Short hairpin RNA, shRNA)能高效和特异性地抑制目的基因的表达。据此，本研究应用RNAi技术，成功的体外构建了针对人及大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达多条siRNA的重组腺病毒载体，并证明其可在包装细胞中高效表达目的基因。并分别从细胞水平和整体水平进行重组腺病毒转染实验研究，证实RNAi 能明显抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3 基因及相关分子信号的表达，针对大鼠PDE5基因的siRNA重组腺病毒可以明显改善正常大鼠及糖尿病ED大鼠的阴茎勃起功能。本研究通过降低PDE5基因的表达而用于治疗ED，为进一步探讨PDE5的生理功能、PDE5在阴茎海绵体平滑肌细胞中的作用机制与勃起功能障碍等疾病之间的关系等奠定了基础。