本项目重点研究miRNA-375调控垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)合成的分子机理。首先利用原位杂交技术确定miR-375在小鼠垂体中表达的激素细胞类型。然后体外培养垂体组织和ACTH瘤细胞系AtT-20, 通过超表达或抑制miR-375的作用, 确定miR-375在垂体ACTH合成中的调控功能和分子作用通路,并利用荧光素酶报告基因系统和RNA干扰方法确定miR-375的靶基因和上游调控基因。最后利用miR-375基因敲除小鼠从整体生理水平阐明miR-375对垂体ACTH细胞增殖、分化和激素合成的调控功能。本项目研究结果对认识垂体ACTH激素合成的miRNA转录后调控机制提供了新的理论依据和实验基础。而且为动物和人类垂体相关内分泌疾病的发生机理和治疗研究提供重要的实验和理论基础。
本项目重点研究miRNA-375 调控垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)合成的分子机理。首先利用原位杂交技术确定miR-375 在小鼠垂体中表达的激素细胞类型。然后体外培养垂体组织和ACTH 瘤细胞系AtT-20, 通过超表达或抑制miR-375 的作用, 确定miR-375 在垂体ACTH 合成中的调控功能和分子作用通路,并利用荧光素酶报告基因系统和RNA 干扰方法确定miR-375 的靶基因和上游调控基因。最后利用miR-375 基因敲除小鼠从整体生理水平阐明miR-375 对垂体ACTH 细胞增殖、分化和激素合成的调控功能。本项目研究结果对认识垂体ACTH 激素合成的miRNA 转录后调控机制提供了新的理论依据和实验基础。而且为动物和人类垂体相关内分泌疾病的发生机理和治疗研究提供重要的实验和理论基础。