中文摘要：

如何实现卵巢癌治疗的高效性和靶向性是目前研究的焦点。调控细胞周期和诱导细胞凋亡是最常用、最有效的策略。Flavopiridol是一种强有力的小分子细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂，但其单独应用于卵巢癌的抑瘤效果并不理想。Caspase-3是细胞凋亡过程中最重要的执行因子，但不能自身激活。本研究应用基因重组技术克隆出能进行自我激活的caspase-3分子；同时构建人端粒酶逆转录酶启动子转录激活系统来调控其转录，实现基因表达的肿瘤特异性；应用RGD肽链（能与整合素结合）修饰的重组腺相关病毒作为载体，提高其对卵巢癌细胞转导的效应性和靶向性。将构建好的载体包装成病毒，纯化、扩增，并与Flavopiridol共同接种于已建立的裸鼠人卵巢癌移植瘤模型中。通过对裸鼠的生存期等指标的检测，研究二者联合治疗卵巢癌的作用及机制。本课题预期目标的实现将为卵巢癌的治疗开拓新的途径，提高卵巢癌治疗的有效性和靶向性。

结论摘要：

Caspase-3能高效引起细胞不可逆性凋亡，但却不能自身激活。Flavopiridol是一种小分子cdk抑制剂，但单独作用抑瘤效果不理想。本研究构建TSTA-hTERTp系统调控的活性caspase-3分子rev-caspase-3,并将之与flavopiridol联合应用，检测二者的抑瘤作用。结果发现，TSTA-hTERTp系统可以显著靶向增强hTERT启动子在卵巢癌细胞和组织中的转录活性；rev-caspase-3有强大的致细胞凋亡能力，TSTA-hTERTp系统调控下表达rev-caspase-3的重组腺病毒AdHTVP2G5-rev-casp3作用后卵巢癌细胞的凋亡率为40.2%,正常细胞为2.12%，抑瘤率为70％，并显著延长裸鼠生存期（213±16d），减轻其对肝脏的毒副作用；AdHTVP2G5-rev-casp3联合flavopiridol作用具有显著的协同杀伤作用细胞存活率为11.6%，抑瘤率81％，裸鼠生存期显著延长（286±6d）。本研究初步探讨了肿瘤基因治疗的靶向性和高效性及细胞凋亡与细胞周期途径抑制肿瘤生长的机制，为卵巢癌的生物治疗奠定了理论及实践基础。