中文摘要：

原发性高血压病是最常见的心血管疾病，系危害人类身心健康最严重的疾病之一，与肥胖、代谢综合症、Ⅱ型糖尿病和晚期肾病有密切关系。高血压动物模型的分子机制研究表明，脂舟、多巴胺受体、NADPH氧化酶及其产物ROS都与高血压病的形成相关。人肾近曲小管细胞是内源性多巴胺产生的重要部位，我们既往的研究初步发现在人肾近曲小管细胞，多巴胺受体、脂舟与NADPH氧化酶及其产物ROS的调节有关，因此，我们推测人肾近曲小管细胞的多巴胺受体、脂舟及氧化应激状态之间的关系与高血压发病机制相关，拟应用动物模型和分子细胞生物学的方法，探讨在人肾近曲小管细胞中，Nox的表达和ROS生成以及相应的活性与多巴胺受体的关系、脂舟在其中的作用以及高血压病人D1R功能受损是否会导致Nox活性以及ROS产生的调节失衡而产生氧化应激状态。本研究课题试图对高血压病的发病机制提出新的理论基础，进而对今后的高血压病的临床诊治提供依据。

结论摘要：

根据课题设计，我们对正常人和高血压人群的肾脏近曲小管细胞进行研究，探讨了NADPH氧化酶亚基、多巴胺受体等在该细胞的表达和分布，分析了正常人和高血压人群之间的区别；研究和探讨了多巴胺及其受体和脂筏等对肾脏进取小管细胞氧化应激状态的调节功能；探讨和研究了D1R调节NADPH氧化酶活性的机制和通路。主要研究结果 1.高血压病人有较高的氧化应激状态在高血压者的肾脏近曲小管细胞中NADPH氧化酶亚基的表达远高于正常人，其Nox的基础活性是正常组的5倍； 2.多巴胺受体对高血压患者氧化应激的调控作用减弱和受损，可能是高血压患者具有高氧化应激状态的机制之一。D1类受体激动剂（fenoldopam）明显减少正常组gp91 phox、p22 phox、p67 phox、rac1等在细胞膜脂筏区域的表达，降低高血压组gp91 phox在脂筏区的表达，但不能减少高血压组p22 phox、p67 phox、rac1蛋白的表达；fenoldopam可以抑制正常组的Nox氧化酶的活性，但对高血压组的Nox氧化酶活性的抑制作用减弱。 3.高血压病人存在肾脏近曲小管细胞膜脂筏结构或功能异常，可能与高血压病人的Nox亚单位的高表达有关。用胆固醇耗竭剂甲基-β-cyclodextrin(MCD)破坏脂筏可降低正常组Nox各亚单位在脂筏区的表达，减少高血压组 gp91 phox的表达和活性，但仅使p22 phox的表达向更低脂筏区移行。 4.D1受体抑制Nox亚基的表达和活性，不依赖D5受体，与PKA和PKC等有关，机制之一是通过PKC与PKA之间的交互作用。PKA激动剂PMA可以增强PKC的各亚基在细胞膜的表达，H89能阻断PMA的这种增强作用。D1受体在人肾近曲小管细胞中增强PKC？S676、PKCq表达的作用是通过PKA途径，可以被PKA抑制剂H89和PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I和Staurosporine 等完全阻断；PKC的激活可以抑制Nox活性。项目成果 1 发表SCI论文3篇，核心期刊论文3篇，待发表SCI杂志1篇，核心期刊文章2篇。 2.培养硕士研究生10名，其中已毕业6名，在读4名。