糖类作为细胞的基本结构成分和初级代谢产物广泛存在于农作物中,且农作物的次生代谢产物也多以糖苷的形式存在,糖类因而成为农产品中普遍存在的功效成分或残留杂质。为此,发展食品的糖类高效质控技术具有重要意义。本研究拟采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)作为还原醛糖的标记分子,提高传统C18色谱柱对系列PMP标记醛糖的分离识别能力,发展"醛糖标识型"高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)分离鉴别技术;同时,在此PMP标记醛糖的高效分离模式基础上,结合蒸发发光散射检测(ELSD)方法,构建大批量还原醛糖和非还原酮糖有机组合的"标识组合型"糖类 HPLC-ELSD指纹鉴别技术,对可能存在于食品中的常见单、寡糖实现高效分离和准确鉴别;并以系列果汁、酒类、益生元食品为主要应用评价体系,首次将该糖类色谱鉴别技术用于食品指纹图谱的构建,克服食品质控中对照品缺乏的问题,为农产品质控技术的发展提供新思路。
Food;;Carbohydrates;;HPLC;;HPCE;;Quality Control Technology
糖类作为细胞的基本结构成分和初级代谢产物广泛存在于农作物中,且农作物的次生代谢产物也多以糖苷的形式存在,糖类因而成为农产品中普遍存在的功效成分或残留杂质。为此,发展食品的糖类高效质控技术具有重要意义。 本项目利用实验室常规配置的高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UV)和普通C18色谱柱,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)作为还原醛糖的标记分子,发展了系列常见还原单寡糖(14种: 氨基葡萄糖、甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖胺、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖)的“醛糖标识型”HPLC-UV分离鉴别质控技术,研究了它们的分离机制与色谱学行为。 本项目也同时构建了10种常见还原单糖的HPLC-UV快速分离鉴别模式,通过调节梯度洗脱模式,10种常见还原单糖可分别在27 min、25 min、18 min和13.5 min内得到良好的基线分离。结果表明,醛糖的PMP标记与流动相TEA配比分离调节相结合,可大幅度调节此系列PMP标记糖的分离度,具有很高的分离控制性。将此HPLC-UV质控技术与我们建立的食物中可能存在的5种非还原酮糖(果糖、山梨糖、蔗糖、棉子糖、水苏糖)的HPLC-ELSD鉴别技术相结合,分别检测糖样品的PMP标记醛糖(低极性)及未衍生化的酮糖(高极性),可进行大批量食品中可能存在的功能成分或残留杂质糖类(约19 种)的质量控制。 本项目采用PMP标记醛糖,利用高效毛细管电泳-紫外检测器(HPCE-UV),在硼酸缓冲液浓度175mM,pH11.0,温度25℃,电压15kV,有机添加剂甲醇浓度4%的基本条件下,实现了13 种常见还原糖的有效分离,并研究了它们的色谱学行为,建立了食物中这些常见单寡糖的HPCE-UV分析鉴别技术。并成功地用于多种多糖的单糖组成分析和蜂蜜、牛奶与啤酒等食物中还原单寡糖的测定,从而为这些食物糖类的质控提供有效的指标。 本项目构建的对可能存在于食品中的常见单寡糖的高效HPLC与HPCE分离鉴别及定量技术,可通过对普通食品中共性成分糖类的动态变化测定,用于普通食品的等级、新鲜度与货架寿命以及真伪的判定,提高食品的质控水平。相关研究结果已发表论文14篇,其中SCI 12篇。