用B淋巴细胞杂交瘤技术,将人RB实体瘤细胞为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备了抗人RB瘤细胞单克隆抗体。采用分子生物学方法,对抗RB单克隆抗体的轻重链可变区基因进行克隆及序列分析,重链约350bp,轻链为321bp,编码107氨基酸。借助该抗体,通过免疫印迹技术,发现了不同于Rb蛋白的RB肿瘤抗原,经离子交换层析纯化及SDS-PAGE分离后,获得了此抗原;再将RB肿瘤抗原致敏树突状细胞,与自体淋巴细胞共孵育后,能诱导出特异性杀伤肿瘤细胞的CTL。此外,将表达EGFP出现绿色荧光的胚胎干细胞细胞诱导分化后,再植入到眼内,不仅出现单一的、表达神经元标记的、形态及生长方式均非常相似于视网膜母细胞瘤的肿瘤生长,且在肝组织内形成了转移性结节;此模型的建立不仅直接揭示RB的发生与干细胞有关,并直接证明了肿瘤细胞起源干细胞,对肿瘤发生学的理论更新具有指导意义。
英文主题词Retinoblastoma;antibody;embryonic stem cell;stem cell