中文摘要：

老年黄斑变性（AMD）是最常见的复杂多因素视网膜变性疾病。我们近来的研究表明1）AKT/mTOR细胞信号通路的激活是RPE细胞应对多种损害的最初分子水平改变，这一分子路径的激活导致了RPE的异常增长，去分化。2）RPE细胞的丧失是继发在病理过程后期发生最终形成了类似于临床上干性AMD患者的典型表现。3）雷帕霉素抑制mTOR基因在动物模型中显著减缓RPE去分化过程并提高了光感受器细胞的数量功能。因此，我们提出以mTOR为靶基因治疗AMD疾病的新思路。我们建立RPE线粒体缺陷鼠模型、RPE氧化损伤鼠模型和激光诱导脉络膜新生血管鼠模型模拟干、湿性AMD病变。应用AAV携带小发卡RNA（AAV-shRNA）技术，视网膜下腔注射特异性抑制RPE细胞中mTOR信号通路。这将不仅可以准确评价特异性抑制RPE细胞中mTOR通路的治疗效果，并将为临床治疗此类疾病体提供新的思路和方法。

结论摘要：

老年黄斑变性（AMD）是最常见的复杂多因素视网膜变性疾病。我们近来的研究表明1）AKT/mTOR细胞信号通路的激活是RPE细胞应对多种损害的最初分子水平改变，这一分子路径的激活导致了RPE的异常增长，去分化。2）RPE细胞的丧失是继发在病理过程后期发生最终形成了类似于临床上干性AMD患者的典型表现。3）雷帕霉素抑制mTOR基因在动物模型中显著减缓RPE去分化过程并提高了光感受器细胞的数量功能。因此，我们提出以mTOR为靶基因治疗AMD疾病的新思路。本项目研究发现在体外细胞模型中（ARPE19），设计相应的shRNA能够抑制或激活mTOR基因对RPE细胞分化的影响，雷帕霉素可以抑制mTOR信号转导通路的激活，上调ARPE19细胞中RPE特异性基因的表达；抑制mTOR信号转导通路后体外培养的RPE细胞系更接近于活体RPE细胞。通过本项目研究，我们能够建立体外培养高等分化的IPS-RPE细胞的培养方法。同时通过加入雷帕霉素能够提高ips-RPE细胞的RPE生化特性，保持RPE细胞正常功能、性状，使其更接近于生理状态的RPE细胞，更适于细胞移植治疗视网膜变性大鼠。同时通过miRNA微阵列分析由ips诱导分化的RPE细胞内特定基因的表达变化情况，从而进一步通过此基因水平的升高或下降，研究该基因如何影响RPE细胞的分化机制，进一步掌握RPE分化过程中的调控机制。