,本课题是申请者对以往研究工作的进一步深入。其主要内容是研究禽类(鸡、鸭、鹌鹑)在不同褪黑素水平下,免疫器官中褪黑素受体的分步变化规律,与免疫相关的细胞因子IL-2、IL-6、r-IFN和MHC-II,学清中IgG及CD4+T细胞和c-fos基因表达的变化规律。对于揭示禽类神经-内分泌-免疫系统间的联系,阐明褪黑素的免疫调节机理具有重要的学术意义,并用禽类作为动物模型,进一步探索MEL在调节人体免
采用RT-PCR技术分别从鸡、鸭、鹌鹑前脑扩增出褪黑素3型受体(Mel1a、Mel1b、Mel1c)的部分cDNA片段,长度分别为603bp、468bp和504bp,测序分析鸭的与鸡3型受体的相应片段同源性分别为93.5%、95.9%和95.0%;鹌鹑的分别为95.5%、97.6%和97.8%。对褪黑素受体3个亚型进行cDNA探针的标记和灵敏度检测,原位杂交法检测到Mel1a、Mel1b和Mel1c受体分别在鸡、鸭、鹌鹑的脾脏、胸腺、腔上囊中均有表达,且随褪黑素水平的变化,受体表达强弱也在变化。流式细胞术分别检测鸡、鸭、鹌鹑外周血中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞及其亚群和Bu-1a+ B淋巴细胞的数量变化,结果表明随褪黑素水平的升高鸡、鸭、鹌鹑外周血中淋巴细胞及其亚群的数量也在升高,反之亦然。采用RIA法和ELISA法测定与免疫相关细胞因子的含量变化,结果褪黑素水平的变化与鸡IL-2,IFN-γ,IgG含量变化呈显著性相关关系,与IL-6,TNF-α含量变化关系不明显。 RT-PCR技术检测c-fos基因在鸡的下丘脑SCN中均有表达,且mRNA表达丰度在各组间差异显著。