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基于量子点的荧光原位杂交技术及其在植物基因组定位中的应用
  • 项目名称:基于量子点的荧光原位杂交技术及其在植物基因组定位中的应用
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30870261
  • 申请代码:C0207
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2009-01-01-2011-12-31
  • 项目负责人:李立家
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:武汉大学
  • 批准年度:2008
中文摘要:

在这个研究中,使用量子点作为标记物制备探针对不同浓缩程度的玉米染色质制片进行荧光原位杂交分析,研究不同浓缩程度的染色质和杂交条件对量子点探针穿透性的影响,并研究和探索实验中遇到的相关问题,建立了最佳化量子点标记物的荧光原位杂交体系,比较分析量子点标记的DNA探针荧光原位杂交和常规的有机染料如FITC和CY3等的荧光原位杂交的检测结果包括荧光强度和荧光淬灭性。证实适当浓度的量子点可以改进提高PCR反应的专一性和产率,进而发展建立了量子点为标记物的PCR标记手段并成功地在玉米染色体上定位低单拷贝DNA序列。建立的量子点为基础的FISH应该也能适用于其它植物基因组分析。在建立的免疫-FISH和ChIP技术基础上研究了植物在冷胁迫环境中以及种子萌发生长发育过程中相关反应基因和调控基因的表观遗传控制机制,这些研究将加深人们对植物染色体结构和功能的认识以及表观调控的了解,为改良植物奠定理论基础。

结论摘要:

英文主题词Quantum dots; PCR; FISH; single copy DNA; maize


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