谷胱甘肽(GSH)是由谷氨酸(Glu)、半胱氨酸(Cys)和甘氨酸(Gly)结合而成的三肽,是细胞内重要的抗氧化剂,也是高等动物中央神经系统中的神经递质。本人从2000年开始研究高等植物拟南芥体内、含有20个成员的谷氨酸受体基因家族(AtGLRs)。2006年发现Glu,Cys,Gly和GSH可以激发植物细胞膜电势快速去极化,这种反应为AtGLR3.3所调控;同时发现这四种物质可以激发植物细胞质内【Ca2+】迅速升高,具有典型的信号分子特征。在随后五年对这一新现象具体生理意义广泛探索的基础上,本人确定如下假说植物细胞感应病原菌后,细胞内GSH迅速升高,GSH开启AtGLR3.3 Ca2+ 通道,细胞质内【Ca2+】升高,启动下游防御基因的表达。在本基金的支持下,我们将结合基因芯片,分子生物学,电生理学和活体细胞内【Ca2+】动态检测技术对这一假说进行深入研究。
calcium;arabidopsis;glutamate receptor;peptide hormone;innate immunity
谷胱甘肽(GSH)是植物体内最丰富的、由三个氨基酸组成的肽。在动物细胞中,GSH不但是重要的抗氧化剂,也是大脑中的神经递质。GSH作为植物细胞内的信号分子的生理和分子机理未知。本研究发现,GSH可以诱导拟南芥叶细胞质内的Ca瞬时升高,升高的强度和GSH的浓度成正相关,同时基本去敏感化的现象,为动物细胞谷氨酸受体钙通道蛋白抑制剂抑制。通过将编码水母发光蛋白的基因aequorin导入缺失谷氨酸受体钙通道AtGLR3.3的拟南芥基因组内,我们证明,GSH诱导细胞质Ca瞬时升高完全是AtGLRC3.3所介导的。基因表达谱芯片研究进一步证明,AtGLR3.3介导大部分GSH对基因表达的调节作用。GSH是植物细胞重要的介导先天免疫的分子。在细菌性病原菌Pst DC3000侵染的情况下,缺失AtGLR3.3基因的拟南芥表现出比野生型更敏感的表型。这些数据表明,AtGLR3.3是介导GSH信号转导的重要基因。相关研究成果以通讯作者身份发表在上。同期期刊发表编辑对这篇论文的重点评论。植物细胞中存在与动物细胞高度相似的先天免疫系统 (innate immunity)。该系统在未接触病原菌时已存在,并能对病原菌侵染作出防卫反应,主要表现为防卫基因的表达。AtPEP1是在拟南芥中鉴定到的新型短肽激素,可以激活含有亮氨酸重复序列的激酶受体AtPEPR1和AtPEPR2。AtPEPR1主要介导AtPEP1在叶子中激发的先天免疫。目前AtPEPR2功能未知。研究发现,AtPEPR2在根中有强表达。缺失AtPEPR2的突变体表现出短根的表型。AtPEP1对atpepr2突变体根延伸的抑制和细胞质Ca诱导作用降低。转录组研究发现,AtPEPR2负责调节AtPEP1诱导的75%的基因表达。拟南芥基因组共有七个编码谷氨酰胺外运蛋白(AtGDU)的基因,其中三个的表达为AtPEP1通过依赖AtPEPR2的途径强烈抑制。AtPEP1强烈抑制AtGDU3启动子的活性。AtPEP1对过量表达AtGDU3拟南芥的根延长的作用降低。这些数据表明,AtPEPR2在介导AtPEP1在根中的信号转导发挥重要功能。研究成果以通讯作者身份发表在。