体外分离扩增自体骨髓间充质干细胞(BMMSCs),并用荧光标记BMMSCs。建立BMMSCs定向分化为角膜缘干细胞的诱导条件和角膜缘损伤的动物模型,用荧光示踪和分子生物学等检测方法动态观测BMSCs在不同条件下向角膜缘干细胞的分化潜能和BMMSCs源性的角膜缘干细胞移植后的功能重建能力,为寻求角膜缘移植新策略提供坚实的实验基础。
成体干细胞-骨髓间充质干细胞具有多种分化潜能,但其是否具有分化为角膜缘干细胞的能力始终未得到证实。本研究通过体内及体外模拟微环境,诱导人骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为角膜缘干细胞,取得以下结果1.利用密度梯度离心-贴壁法,成功建立体外分离、培养及扩增人BMMSCs的标准化方法;2.建立了BMMSCs稳定的体外BrdU标记方法;3.初步建立了体外诱导BMMSCs向角膜上皮细胞分化的诱导条件;4. 建立诱导BMMSCs向角膜上皮细胞分化的动物模型。研究表明骨髓间充质干细胞具有分化为角膜上皮细胞的能力,这为今后利用MSCs解决组织工程角膜的种子细胞来源问题,以及为角膜缘功能障碍类疾病提供替代细胞来源奠定了坚实的实验基础。