鸡早期胚胎的体外发育、短的细胞周期等特性,使其成为了研究畜禽生长发育、细胞分化、遗传疾病诊断的良好模型。本项目利用免疫磁珠法,通过减法杂交技术分离鸡早期胚胎不同发育阶段差异表达的基因,借助生物信息学手段推测基因功能,采用Knockdown(RNAi)技术研究基因功能,在分子、细胞、个体三个层面上研究基因功能,为从理论上和实践上提高畜禽生产性能提供理论基础。建立鸡早期胚胎体外培养体系、完善高效转基因方法、筛选适宜的片段,研究基因Knockdown后的变化,建立基因功能甄别的技术平台,提高我国基础理论的研究水平,申报相应专利,为挖掘我国优良的动物遗传资源奠定基础。
鸡早期胚胎的体外发育是研究畜禽生长发育、细胞分化、基因表达调控、遗传疾病诊断与遗传修饰的良好模型。利用纸环法和半蛋壳体外培养鸡早期的技术平台,发现高pH值(9.0以上)培养条件可以促进进细胞的增殖,低pH值可加速细胞的分化而使体节数减少,造成胚胎发育迟缓或异常;探讨了鸡胚盘细胞体外增殖与分化的营养需求,发现鸡胚盘细胞在早期主要利用卵黄颗粒作为能量的来源,并进行糖原的积累,而对葡萄糖的利用效率没有明显的提高,提出了6-磷酸葡萄糖可以明显抑制细胞的凋亡,进而促进胚盘细胞增殖与分化,开发了新型体外培养体系,实现了鸡胚胎干细胞的体外大量增殖;建立了利用4-NQO诱发细胞凋亡的技术平台,发现4-NQO通过P53途径诱发细胞的凋亡,对研究胚胎发育过程中细胞凋亡的分子机理提供了良好的理论与技术基础;建立了具有创新性的免疫磁珠减法杂交技术,实现了差异表达基因的有效富集;FGF4可促进肌管的融合,但伴随着FREK基因的下调表达。鸡胚胎发育是一个庞大的系统工程,涉及了大量的分子与细胞学事件,新基因的发现将为鸡产肉性能的改善提供新的靶点。