绿脓杆菌外毒素A(PEA)是绿脓杆菌的主要致病物质。研究显示抗PEA的多克隆抗体可整合PEA对小鼠的致死性攻击。本研究用纯化的PEA免疫BALB/C小鼠, 取脾脏淋巴细胞与Sp2/0细胞融合,经有限稀释法,分离培养单克隆细胞。用PEA作检测抗原,通过ELISA法检测融合细胞培养上清液中单克隆抗体分泌情况,经过3轮筛选获得株有稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为14F10, 23B9,23C12及24B5。将杂交瘤注射BALB/C腹腔,可产生高滴度单克隆抗体(105滴度)。4株PEA单克隆抗体的相对亲和力和抗原结合位点分析表面它们识别的PEA抗原位点各不相同。单克隆抗体可保护PEA对培养PMN的细胞毒作用。动物实验证实,单克隆抗体可保护PEA对小鼠的致死性攻击,但不能保护绿脓杆菌对小鼠的致死性攻击。PEA单抗若与与抗内毒素单抗混合使用则可保护绿脓杆菌对小鼠的致死性攻击。
英文主题词P.aeruginosa; exotoxin A; monoclonal antibody; hybridoma