中文摘要：

注意缺陷多动障碍是常见的儿童行为障碍，学龄儿童的患病率在5％左右，其症状常持续到青春期乃至成年期，对患者的社会功能产生深远的不利影响。遗传学变异、表观遗传学突变和环境因素可能共同参与该病的发病。本研究首次将表观遗传学因素纳入该疾病的研究中，以DAT1、COMT、DR4等多巴胺能基因为候选基因，收集ADHD患者及与患者年龄、性别相匹配的健康对照为的外周血，对ADHD患者进行6周哌醋甲酯系统滴定治疗并评估疗效。通过亚硫酸盐修饰后测序法和甲级化特异性PCR( MSP)方法检测候选基因的DNA甲基化水平，并采用半定量RT-PCR和随后Real-time PCR等方法检测候选基因表达的改变，比较ADHD与对照候选基因甲基化程度的差异及不同程度甲基化和mRNA转录表达的关系，综合考察遗传表型和DNA甲基化水平对疾病易感性及哌醋甲酯疗效的影响。本研究对于全面解释该疾病发病机制和病理过程具有较大的意义。

结论摘要：

[摘要] 目的 了解注意缺陷多动障碍(Attention Deficit Hyperactivity Disorder, ADHD)患儿DAT1、DRD4、NET等候选基因DNA甲基化水平以及基因多态性与ADHD患病的关联及哌醋甲酯疗效的关系。 方法 以111例符合DSM-IV诊断标准的汉族ADHD儿童以及118例正常汉族儿童为研究对象，对所有ADHD儿童均给予6周系统的哌甲酯剂量滴定治疗并评估疗效。采用直接测序法检测候选基因DAT1、DRD4启动子区CpG岛片段中CpG位点的甲基化状态。以其中52例ADHD患儿为对象，采用实时荧光定量PCR法检测候选基因相对表达量，比较服药前与服药后的基因表达水平差异；对98例ADHD患儿DAT1基因第15外显子3’非翻译区(3' untranslated region, 3’UTR)40bp VNTR和5’侧翼区C-839T、A-67T， NET基因第9外显子G1287A和第9内含子G1389+9A，以及DRD4启动子区C-521T、第3外显子48bp VNTR一共7个位点进行基因型分析。 结果 （1）病例组与对照组的DAT1基因、DRD4基因启动子区甲基化水平无差异（P>0.05）；（2）病例组中哌醋甲酯治疗有效和无效的患儿DAT1基因、DRD4基因启动子区甲基化水平无差异（P>0.05）；（3）DAT1基因启动子区在8岁及以上年龄组中的甲基化水平显著高于7岁及以下年龄组（P<0.05），DRD4基因则不随年龄发生变化（P>0.05）；（4）ADHD患儿服药前后DAT1基因表达量差异无统计学意义（P>0.05）；（5） DAT1 C-839T多态性中C/C基因型在CPT漏报数T分上的有效率高于T/T基因型和C/T基因型（p＜0.05），DAT1 A-67T中T/T和A/T基因型在Conners量表多动指数上的有效率高于A/A型（p＜0.05），NET G1389+9A中A/A基因型在ADHD-RS-Ⅳ多动冲动分上的有效率高于G/A基因型和G/G基因型（p<0.05）；结论 儿童注意缺陷多动障碍的患病及哌醋甲酯治疗疗效可能与DAT1基因、DRD4基因启动子区甲基化水平无关，而DAT1 C-839T、DAT1 A-67T和NET G1389+9基因多态性则可能影响哌醋甲酯的疗效。