中文摘要：

Kras突变启动了胰腺癌前病变PanIN，Tp53或p16失活均可单独促进小鼠PanIN发展为胰腺癌（PDA）。人PDA中另一高频率的Smad4失活对PanIN转化作用如何以及Smad4失活是否也可单独促进PanIN发展为PDA仍不清楚？基于此目的，应用RNA干扰技术，我们成功地构建了含miRNA的慢病毒并感染和静默了Kras突变PanIN细胞Smad4表达；对有和无miRNA稳定转染的PanIN细胞生物学行为的比较结果显示Smad4静默，促进了PanIN细胞的贴壁依赖性生长和软琼脂中非贴壁依赖性生长，具恶性特征；Smad4沉默促进了PanIN细胞的运动、迁移和侵袭能力；对Smad4静默的PanIN细胞裸鼠体内致瘤性研究显示，Smad4沉默促进移植瘤增殖和及转移能力；对其遗传学分析表明，两者除有Kras突变外，并无Tp53、p16、BRCA2突变或缺失。提示，Smad4失活促进了PanIN的恶性转化，在体外也可单独促进PanIN发展为PDA。此外，同时发现，在病毒制备过程中RNA干扰技术可通过静默靶基因的表达，减少营养消耗而促进病毒的包装，提高病毒的产量，节省病毒制备时间。