本项目在以往研究的基础上,通过临床试验与实验实验相结合的方法进行研究。临床研究方面,观察比较高血压病患者与健康人大网膜中较大系膜动脉重塑状况的差异,并借助流式细胞术、免疫组化染色等技术探讨高血压病患者大网膜组织中较大系膜动脉重塑的深层机制;动物实验方面,以钩藤提取物作为干预手段,利用光镜和电镜等技术对SHR主动脉重塑作形态定量学观察,利用流式细胞仪和细胞体外培养技术测定其平滑肌细胞增殖、胶原合成、凋亡异常,以及细胞膜内外信号转导的深层机理,以揭示钩藤提取物抗高血压血管重塑的分子机制。从而对高血压及其靶器官损害的防治有着积极的理论意义和临床应用价值。
以高血压病患者和SHR为试验对象,运用分子生物学等技术,探讨高血压血管重塑的发病机制及钩藤提取物的干预效应。对高血压患者大网膜组织中较大系膜动脉重塑研究显示血管壁Bcl-2、Bax、c-myc、c-fos、MMP-9、TIMP-2蛋白较强表达。对SHR胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉重塑研究显示血管壁AngⅡ升高、平滑肌细胞凋亡率及凋亡mRNA表达较低,Bcl-2蛋白表达较高,Bax蛋白表达较低;CD62P、CD25、c-Myc、c-fos、LN、FN、Ⅰ型胶原蛋白表达较高、PDGF-BmRNA表达较高,TGF-β1蛋白表达较低;MMP-2、MMP-9蛋白/mRNA表达较低,TIMP-2蛋白/mRNA表达较高,而钩藤提取物通过干预上述诸环节而发挥抗高血压血管重塑的作用。体外实验显示钩藤提取物能调控血管平滑肌培养细胞株的细胞周期、抑制其增殖,其机制与抑制c-fos和c-Myc蛋白和mRNA、NF-KB蛋白、AT1R蛋白、Stat3蛋白和Ca2+有关;钩藤提取物能提高血管平滑肌培养细胞株凋亡率、诱导其凋亡,其机制与调控Bcl-2、Bax 蛋白和mRNA表达有关。