蛾类昆虫两性间的化学通讯具有极高的特异性和灵敏性,其生化和分子机制是近年动物嗅觉通讯研究的前沿热点,具有重要的科学意义和潜在应用价值。信息素结合蛋白(PBP)在两性间的信息感受中起重要作用,近年在多种蛾类昆虫的触角中发现有2种甚至3种不同的PBP。不同PBP的时空表达特征如何,它们在功能上又有什么样的分化?本项目拟以重要农业害虫甜菜夜蛾为对象,在我们前期鉴定出3个不同PBP的基础上,进一步利用原位杂交和实时定量PCR技术比较3种PBP在触角内的时空表达差异,并通过RNAi技术及PBP的体外表达和结合实验等研究3种PBP在功能上的分化。研究结果可为进一步明确PBP与性信息素组分间的互作机制,以及为开发基于嗅觉感受的新型害虫行为阻断剂或干扰剂,提供科学依据。
pheromone binding protein;Spodopera exigua;Spodopera litura;spatio-temporal expression;functional differentiation
蛾类昆虫两性间的化学通讯具有极高的特异性和灵敏性,其生化和分子机制是近年动物嗅觉通讯研究的前沿热点,具有重要的科学意义和潜在应用价值。信息素结合蛋白(PBP)在两性间的信息感受中起重要作用,蛾类昆虫一般含有 3 种不同的 PBP基因。不同 PBP 的时空表达特征如何,它们在功能上又有什么样的分化?本项目以重要农业害虫甜菜夜蛾和斜纹夜蛾为对象,在前期鉴定出 3 个不同 PBP基因的基础上,进一步通过半定量PCR、定量PCR、离体配体结合试验和活体RNAi实验等研究技术,对上述问题进行研究。主要研究结果有1)在两种夜蛾中,3个PBP基因均只在(或几乎只在)触角中表达,但3个基因表达量在雌雄间的差异明显不同。PBP1在雄性触角中显著高表达,而PBP2和PBP3在雌雄间差异较小。2)3个PBP 对不同性信息素组分均没有明显的选择性,但不同PBP对性信息素组分的结合能力显著不同,PBP1显著高于PBP2和PBP3。3)综合分析认为,PBP1在性信息素感受中起主要作用,PBP2和PBP3起次要作用,且3个PBP对性信息素不同组分均没有明显的识别作用。在对两种夜蛾PBP功能分化研究的同时,为了更全面了解昆虫的嗅觉机制,我们还开展了以下扩展研究(1)对两种夜蛾的其他嗅觉基因(GOBP、CSP、OR和SNMP)及其功能进行研究;(2)对其他重要代表性昆虫(褐飞虱、大螟和樟巢螟)的PBP等嗅觉基因及其功能进行研究。上述研究所取得的成果对于明确昆虫的嗅觉机制,以及为开发基于嗅觉感受的新型害虫行为阻断剂或干扰剂,均具有重要意义。