本项目从高富硒(Se)、碲(Te) 螺旋藻中分离纯化含硒、碲的藻蓝蛋白(PC)(即Se-PC和Te-PC),采用多种手段确定Se、Te氨基酸形态及其在肽链中的位置。用酶水解法制备Se-PC和Te-PC的活性肽,利用凝胶层析、离子交换层析及高效液相色谱等方法,对酶降解产物中的有效组分进行分离提纯。采用MTT法,选择多种肿瘤细胞株,研究了Se-PC、Te-PC和Se-PC、Te-PC的活性肽体外抗肿瘤活性,。用Western Blot法研究Se-PC和Te-PC对癌细胞中4种关键的凋亡调节基因的表达与活化的影响,如caspase-3,Bcl-2,Bax和p53。评价其体内抗肿瘤活性,以肿瘤体积、重量等指标,评价其体内抗肿瘤活性的效果。所得蛋白及多肽均具有良好的体外抗肿瘤活性,能通过激活p53而诱导G1细胞周期阻滞和线粒体介导的细胞凋亡而抑制肿瘤细胞生长。纯化的Se-PC充分发挥了硒与藻蓝蛋白在抗氧化、抗肿瘤方面的协同作用,具有新颖的生物活性。通过本项目的研究,阐明了Se、Te掺入对PC及其降解肽的结构与活性调控规律。明确Se-PC和Te-PC的抗肿瘤作用及其作用机制。
英文主题词Selenium-, tellurium-containing phycocyanin; Biotransformation; Cell apoptosis; Anticancer activity