微生物降解是土壤中多环芳烃(PAHs)消减的主要途径。发掘潜在高效的PAHs降解微生物物种、明确其降解机制对污染土壤的生物修复具有重要意义。稳定同位素探针(Stable Isotope Probing)技术脱离了传统分离培养的限制,可以将未知的微生物种群和其功能直接联系起来。本研究拟以典型的PAHs污染土壤以及干净的农田土和森林土为研究对象,采用土壤微宇宙(microcosm)样品同位素标记的方法,研究典型PAHs(菲、芘和苯并[a]芘)降解过程中的功能微生物种群组成,结合中间产物及功能基因分析,揭示其降解过程和降解机制;土壤同位素原位标记与微宇宙实验相结合,研究植物根际PAHs降解过程中功能微生物种群的动态变化,阐明植物不同生长阶段根系分泌活动对功能微生物以及PAHs降解过程的影响,为PAHs污染土壤的根际修复提供微生物资源和理论依据。
SIP;PAHs;Biodegradation;Functional microbe;Rhizosphere
微生物降解是土壤中多环芳烃(PAHs)消减的主要途径。发掘潜在高效的PAHs降解微生物物种、明确其降解机制对污染土壤的生物修复具有重要意义。稳定同位素探针(Stable Isotope Probing)技术脱离了传统分离培养的限制,可以将未知的微生物种群与其功能直接联系起来。本研究采用土壤微宇宙(microcosm)样品同位素标记的方法,研究土壤中典型PAHs(菲、芘和苯并[a]芘)降解过程中的功能微生物种群组成,结合功能基因分析,揭示其降解过程和降解机制;土壤同位素原位标记与微宇宙实验相结合,研究植物根际分泌物对PAHs降解过程中功能微生物种群影响,阐明根系分泌活动对功能微生物以及PAHs降解过程的影响。研究成功建立应用DNA-SIP技术鉴定土壤中低环和高环多环芳烃降解功能微生物的方法,挖掘出复杂环境中参与菲、蒽、荧蒽、苯并芘代谢的微生物和多种功能基因,首次发现Acidobacterium, Collimonas属细菌对多环芳烃的降解能力,以及Bacteroidetes属菌株对苯并芘的降解能力。分离出应用DNA-SIP技术鉴定到的菲降解功能菌,获得该菌株中的多环芳烃降解基因xyLE和ARHD基因簇,并将其联合黑麦草应用于重金属-有机物复合污染土壤修复,效果良好。本项目为PAHs污染土壤修复提供微生物资源,为发展经济、高效、安全的土壤有机污染修复实用技术提供了理论依据与技术支撑。