中文摘要：

克隆白血病相关新基因有助于深入阐述白血病发生、发展的分子生物学机制。MLAA-34是我们实验室筛选出的一个新的白血病相关基因；我们前期研究发现并提出:MLAA-34是功能未知基因CAB39L的一个新转录剪接变体、其在白血病患者的外周血单个核细胞中高表达、应用RNAi技术发现其表达抑制可诱导白血病细胞系U937细胞凋亡。本项目拟对MLAA-34基因对白血病细胞的抗凋亡作用开展进一步研究:首先应用MLAA-34的慢病毒表达载体研究MLAA-34过表达对U937细胞凋亡的影响；其次分别应用MLAA-34的RNAi干涉载体与慢病毒表达载体研究其对其它多种白血病细胞株凋亡的影响；最后应用免疫共沉淀、蛋白双向电泳及质谱分析技术研究MLAA-34蛋白在细胞中的相互作用蛋白分子，以推测其可能的抗凋亡分子机制。通过本项目的实施，可对功能未知基因MLAA-34(CAB39L)的具体抗凋亡机制提供新的线索。

结论摘要：

人类白血病的发病机制尚不完全清楚，克隆白血病相关新基因有助于深入阐述白血病发生、发展的分子生物学机制。MLAA-34是我们实验室用SEREX法从人急性单核细胞白血病细胞系U937的cDNA文库中筛选出的一个新的肿瘤相关基因；我们前期研究发现并提出 MLAA-34是功能未知基因CAB39L的一个新转录剪接变体；发现其在临床白血病患者的外周血单个核细胞中高表达；利用RNA干扰技术发现其在U937细胞系中具有抗凋亡作用。本项目进一步研究MLAA-34基因对白血病细胞的抗凋亡作用机制。结果表明1.应用MLAA-34的慢病毒表达载体研究MLAA-34过表达对U937细胞株凋亡的影响，从细胞形态学、MTT实验及流式细胞仪检测凋亡均证实MLAA-34的表达上调可对抗U937细胞凋亡。2.在高表达MLAA-34的人高转移潜能肝癌细胞株MHCC97-H中，分别应用MLAA-34的RNAi干涉载体与慢病毒表达载体研究其对细胞凋亡的影响，发现MLAA-34具有抗凋亡作用。3. 利用免疫共沉淀（Co-IP）技术处理MLAA-34过表达U937细胞，通过SDS-PAGE、Shotgun蛋白质组学策略结合生物信息学分析对其相互作用的蛋白质进行分析后鉴定出256种蛋白质，其中包含225种已知蛋白和31种未知功能蛋白；我们运用DAVID和KEGG数据库对225种已知蛋白进行功能分类和信号通路分析，发现其中有132种蛋白质不同程度地参与细胞凋亡或者增殖的生物学过程，MLAA-34抗凋亡作用可能与Ras信号通路、Wnt信号通路、钙离子通路和趋化因子通路相关；同时发现与p53密切相关的基因CLTC、PPP2CA、SOD2、PARK7和HSPA9，与Caspases家族密切相关的基因TXN、ESR1和YWHAE。通过本项目的实施，进一步证明MLAA-34(CAB39L)基因的抗凋亡作用；MLAA-34抗凋亡作用可能与Ras信号通路、Wnt信号通路、钙离子通路和趋化因子通路相关。