中文摘要：

肿瘤休眠是肺癌转移和复发的根源和病人死亡的主要原因，分子生物学的发展使研究肿瘤休眠调控机制及克隆相关基因成为可能。应用逆转录病毒介导的GFP基因转移对活细胞标记的技术，构建逆转录病毒载体质粒pLXSN-EGFP和pLXSN-nm23-H1-EGFP，得到GFP标记的肺癌细胞株L9981-EGFP和L9981-nm23-H1-EGFP；建立nm23-H1基因诱导的肺癌休眠实验动物模型，应用流式细胞仪筛选、分离GFP标记的肺癌休眠细胞；分析肺癌休眠细胞的增殖动力学变化及其增殖潜能；应用核糖核酸酶保护（RPA）和Western blot技术检测肺癌休眠相关信号转导途径关键酶mRNA表达及蛋白磷酸化水平；应用抑制消减杂交技术（SSH）分析肺癌增殖与休眠细胞的差异表达基因,并筛选、鉴定。初步阐明肺癌休眠的分子调控机理，为临床针对肺癌休眠诊治的新技术、新方法和新药物的开发提供实验依据和理论基础

结论摘要：

肿瘤细胞休眠是肺癌复发、转移和患者死亡的的主要原因。研究肺癌休眠的分子机制具有重要临床应用价值。本研究主要结果为（1）建立nm23-H1基因诱导的人肺癌裸鼠肺内休眠动物模型。（2）肺癌休眠细胞的增殖指数和凋亡指数均显著降低；再次激活仍具有致瘤性。（3）肺癌休眠细胞中Erk1(2)mRNA表达水平和Erk酶活性显著降低；p38 mRNA 和p38MAPK 酶活性明显增高；且p53\Rb\Cdc2表达水平显著增高。（4）L9981细胞休眠前后差异表达基因共1798条，其中上调为1156条，下调为642条。在上调基因中有未知功能基因1035条，而功能清楚121条，其中包括细胞周期与凋亡基因31条，抑癌基因18条、转移相关基因12条，细胞因子与转录因子13条，细胞信号与蛋白相关基因38条，细胞外基质与骨架蛋白9条。在下调基因中541条功能不明，而已知基因有101条，其中细胞周期与凋亡基因12条、癌基因11条，抑癌基因3条、转移相关基因14条，细胞因子与转录因子21条，细胞信号与蛋白相关基因27条，细胞外基质与骨架蛋白13条。