内容(1)在已克隆和表达不同来源的木聚糖酶基因基础上,采用基因重组技术,构建系列木聚糖酶重组基因,导入毕赤氏酵母中表达;以温度为选择压力,筛选出耐高温重组木聚糖酶基因表达子,并分析重组基因序列。(2)开展耐高温木聚糖酶在酵母中高效表达研究,纯化耐高温木聚糖酶,分析其稳定性,从而明确与酶热稳定性相关的酶基因结构特征。(3)开展饲料制粒温度对酶活性影响研究,揭示酶的耐高温性能。(4)模拟动物消化道环境条件,研究木聚糖酶在动物消化道内的稳定性,阐明耐高温木聚糖酶在动物消化道内的变化规律,为耐高温木聚糖酶应用提供科学依据。意义木聚糖酶能高效降解半纤维素中主要成分木聚糖,大幅度提高饲料利用效率,在饲料工业中具有巨大的应用前景。但木聚糖酶作为安全高效的生物饲料添加剂,在饲料制粒过程中遇高温易失活,以及在动物消化道不稳定,从而直接影响其应用效果,因此提高木聚糖酶的稳定性是当前急需解决的难题。
内容(1)克隆和表达不同来源的木聚糖酶基因;以温度为选择压力,采用基因重组技术,构建出耐高温重组木聚糖酶基因,并分析了重组基因序列特征。(2)开展了耐高温木聚糖酶在酵母中高效表达研究,纯化耐高温木聚糖酶,分析其稳定性,明确与酶热稳定性相关的蛋白质结构特征。(3)开展了饲料制粒温度对酶活性影响研究,揭示了酶的耐高温性能。(4)发现了耐热木聚糖酶水解木聚糖和麦麸不溶性木聚糖形成的产物主要以功能性木寡糖为主的新特点。(5)揭示了木聚糖酶在动物消化道内的稳定性,阐明了耐高温木聚糖酶在动物消化道内的变化规律,为耐高温木聚糖酶应用提供科学依据。 意义木聚糖酶能高效降解半纤维素中主要成分木聚糖,大幅度提高饲料利用效率,在饲料工业中具有巨大的应用前景。但木聚糖酶作为安全高效的生物饲料添加剂,在饲料制粒过程中遇高温易失活,以及在动物消化道不稳定,从而直接影响其应用效果,因此本项目获得的耐热木聚糖酶不仅具有重要的理论价值,而且具有极大的潜在应用价值。