蔷薇属植物遗传转化体系建立困难且基因型依赖性强,制约着分子育种。申请者发现狗蔷薇类原球茎(PLB)具有体胚聚合体的特征,确认PLB适合作为遗传转化受体,证实PLB发生与RcLEC1、RcWUS表达紧密关联。进一步揭示RcLEC1、RcWUS在狗蔷薇PLB发生中的各自作用和相互关系,便于以狗蔷薇为参考植物,建立适合多数蔷薇属植物的基于PLB的高效遗传转化体系,突破蔷薇属植物尤其是月季的分子育种瓶颈。本项目利用独创的狗蔷薇PLB高效发生体系、基于PLB的遗传转化体系,以及在PLB启动-发生-发育各阶段的精准取材技术体系,通过基因过表达、RNAi干扰相结合的方法,验证RcLEC1和RcWUS在狗蔷薇PLB发生过程中的功能;利用双分子荧光互补、酵母双杂交等技术分析RcLEC1和RcWUS蛋白相互关系;为揭示狗蔷薇PLB发生机理,诱导蔷薇属植物PLB高效发生,提供分子生物学依据。
Rosa Canina;PLB;RcWUS;TDZ;development mechanism
本课题组按照项目计划书部分完成任务1和2, 完善并扩展完成任务3的内容。根据研究的实际情况对项目计划进行了适当的调整,在任务3的基础上增添以下四部分的研究内容3.1寻找RcWUS基因的下游互作基因;3.2研究类根体形成过程中的关键调节因子,并通过光质组合优化PLBs的发育过程; 3.3从分子水平上解析TDZ启动狗蔷薇PLBs分子机理;3.4 筛选PLBs发育过程中特异表达的关键调节基因RcABP19a,并对其功能进行研究。