中文摘要：

我国食管癌发病率和死亡率约占全世界50%左右，就诊时多为中晚期，需接受放射治疗，疗后5年生存率仅10%左右，局部复发致死率却高达60%～80%。如何增加食管癌细胞放射敏感性，改善长期生存，一直是肿瘤放射治疗研究的热点。申请者已完成细胞周期相关蛋白表达与食管癌放射敏感性关系的研究，有关CHK1和CHK2的短发卡RNA（shRNA）影响食管癌细胞放射敏感性的体外研究显示，转染后CHK1和CHK2蛋白表

结论摘要：

本课题的预期目标是通过采用MDC1和53BP1的shRNA病毒表达载体转染体外和体内食管癌细胞，抑制干扰MDC1和53BP1蛋白表达，阻断DNA损伤信号传导，消除照射后细胞周期阻滞，减少DNA损伤修复，从而增加放射敏感性。我们采用克隆形成实验筛选出放射敏感的食管癌细胞株（TE-13）和放射抗拒的食管癌细胞株（ECA109）,观察了不同放射敏感性的细胞株照射后细胞周期分布和周期相关蛋白的表达，结果两株细胞均出现G2/M期的阻滞，CHK1、CHK2、MDC1和53BP1的蛋白表达没有明显变化，但免疫荧光观察发现核内斑点的数量呈现量效关系和时效关系。对细胞周期检测点激酶CHK1和CHK2成功进行了shRNA转染，成功筛选出MDC1和53BP1基因低表达稳转食管癌细胞株，两种转染均使细胞照射后G2/M期的阻滞不同程度的消除，CHK2T68的磷酸化受到抑制。而且申请者成功建立了MDC1和53BP1基因低表达稳转细胞株的裸鼠模型，发现放射线照射后，实验组的肿瘤生长速度均慢于对照组，在体内首次证明了抑制MDC1和53BP1基因蛋白表达后，确实起到了放射增敏作用。目前基础研究已基本结题，达到预期目标。