中文摘要：

HBV特异性CD8＋T细胞是机体清除病毒、引起肝损伤的主要效应细胞。新型抗炎蛋白TIPE2通过负调控T细胞特异性受体信号转导，保持适应性免疫稳态。申请者前期首次研究发现，TIPE2在慢性活动型乙肝患者PBMCs表达下调，与血清ALT水平负相关，且TIPE2-/-鼠更易于诱导乙肝的形成，提示TIPE2对乙型病毒性肝炎的发生具有负调控作用。据此提出本课题的研究假说TIPE2通过调控HBV特异性CD8+T细胞的细胞毒效应、增殖及分泌IFN-?等功能，影响乙型病毒性肝炎的病程进展及转归。为此，本课题拟利用细胞模型、TIPE2基因敲除鼠、HBV转基因鼠、临床标本，研究TIPE2调控HBV特异性CD8＋T细胞功能的核心环节，明确TIPE2调控的胞内信号通路，揭示TIPE2负调控乙型肝炎的分子机制，以期发现在HBV感染时能够有效调控免疫稳态的关键分子，为免疫干预HBV感染、阻断病程的慢性化奠定基础。

结论摘要：

HBV特异性CD8＋T细胞是机体清除病毒、引起肝损伤的主要效应细胞。TIPE2，肿瘤坏死因子？诱导的蛋白8-2 (Tumor necrosis factor-？ induced protein-8-like 2)，是新近发现的新型免疫分子，通过负调控T细胞特异性受体信号转导维持免疫稳态。但TIPE2在乙型肝炎病毒(HBV)感染所致的相关肝病中的功能未明，为此，本课题以慢乙肝患者的临床标本检测为起点，结合肝炎动物模型、细胞实验，利用real-time PCR、FCM、细胞培养等多种研究方法，系统地探讨了TIPE2在HBV感染相关肝病中的作用及可能机制。结果发现① TIPE2在慢性活动型乙肝患者PBMCs表达下调，表现为TIPE2的CD4+T细胞数量和荧光强度均无显著性变化，而CD8+T的数量虽无明显改变，但表达TIPE2的荧光强度较正常对照显著降低，且TIPE2表达强度与血清ALT/AST/HBV DNA成负相关；分离获得患者及正常人的PBMCs加入HBV抗原肽（HBc18-27）进行培养，结果发现HBc18-27刺激后CD8+T细胞的TIPE2表达明显降低，但其活化水平和杀伤功能均显著增强细胞，说明TIPE2主要调控CD8+T细胞功能参与HBV感染；② 动物实验进一步验证，TIPE2基因缺失后（TIPE2-/-鼠）的小鼠更易于诱导乙肝的形成，TIPE2-/-的PBMCs过继转输给HBV转基因鼠亦可以诱导较C57小鼠更强的肝脏炎症反应；③ 肝炎患者标本和动物模型肝炎组织检测均证实HBV感染后可诱导肝细胞的TIPE2表达增强。本课题研究结果提示，TIPE2通过调控HBV特异性CD8+T细胞的细胞毒效应、增殖及分泌IFN-？等功能，影响乙型病毒性肝炎的病程进展及转归，为免疫干预HBV感染、阻断病程的慢性化奠定基础。本课题的创新点及意义在于，①在国际上首次研究新型抗炎蛋白TIPE2与HBV感染的关系，属原创性研究；②获得理论突破分析研究结果提出新型调节分子TIPE2负调控乙型病毒型肝炎发生的论断；③进一步阐明了HBV感染的免疫机制，为免疫清除感染病毒的临床治疗提供新的思路。