中文摘要：

DC分化成熟障碍是胃癌免疫逃逸中的关键问题，IL-6-STAT3信号途径在DC分化成熟障碍中起重要作用，但其分子机制尚不清楚。新近研究发现核受体PPAR-γ活化后，在核内直接抑制NF-κB活性而阻碍DC分化成熟。本项目组在前期工作中发现用IL-6处理的DC成熟障碍模型中不仅存在STAT3持续磷酸化，而且伴有PPAR-γ活性显著增强，由此我们推测STAT3途径可能通过某种机制激活PPAR-γ从而介导DC分化成熟障碍。本研究拟在前期工作的基础上，采用western blot、实时定量RT-PCR和液质联用分析等手段研究STAT3信号是否通过增强iNOS依赖的NO产生，促进DC内硝化脂肪酸的生成，继而间接激活PPAR-γ，并通过反向阻断性试验进行验证，深入阐明IL-6-STAT3途径诱导DC分化成熟障碍的分子机制，为纠正胃癌免疫抑制状态提供可能的干预靶点，为胃癌的临床免疫治疗提供新的策略。

结论摘要：

完成了原计划的主要研究内容。证实了IL-6信号通过下游的JAK2-STAT3直接作用于PPAR-γ启动子增强其表达，进而显著增强其活性来介导DCs的分化成熟障碍。具体内容如下（一）成功建立了人的DCs分化成熟障碍模型首次以人单核细胞为起源细胞，通过细胞因子诱导为未成熟DCs，随后经过LPS刺激和IL-6干预，FCS检测证实其存在分化成熟障碍; （二）探讨了IL-6诱导人DCs分化成熟障碍的分子机制首先明确IL-6可增强p-STAT3水平和PPAR-γ表达及活性；其次生物信息学预测发现PPAR-γ启动子上有STAT3结合位点，并通过报告基因证实STAT3参与调控PPAR-γ转录活性；分别过表达或干扰PPAR-γ及STAT3，进一步证实IL-6信号通过下游的JAK2-STAT3直接作用于PPAR-γ启动子增强其表达，进而介导DCs的分化成熟障碍；（三）鉴定了人胃癌标本中DCs的表型从人胃癌标本中分选纯化出DCs，结合LPS刺激，FCS检测证实其分化成熟存在障碍，同时免疫印迹检测证实其STAT3的磷酸化状态增强及PPAR-γ活性增高；（四）探索了IL-6的组织来源免疫组化检测证实胃癌细胞也可分泌大量的IL-6,为肿瘤免疫微环境中抑制性细胞因子的一大来源。本研究初步证实了本课题的科学假设胃癌细胞通过分泌大量的炎性细胞因子IL-6，诱导组织DCs分化成熟障碍，形成抑制性免疫微环境，有助于胃癌细胞的免疫逃逸，进而导致胃癌的形成和转移，本项目可为纠正胃癌免疫抑制状态提供可能的干预靶点，为胃癌的临床免疫治疗提供新的策略。