脑缺血是我国常见的中老年疾病,由此引起的神经元缺失是导致功能缺损的根本原因。近年来研究证实脑内存在的神经干细胞具有分化产生新神经元的能力,使脑的自我修复成为可能,脑缺血后神经干细胞增殖、移行、分化新神经细胞以替代死亡细胞,并受细胞微环境的调控,补阳还五汤能促进这种神经再生。因此,我们运用蛋白质组学手段从体内、体外两方面探讨脑缺血后内源性神经再生的分子机理及补阳还五汤促进内源性神经再生的机制,为脑缺血后神经功能修复提供新的药靶并为中医药治疗脑缺血提供理论依据。
脑缺血后可激发内源性神经再生,补阳还五汤能促进神经再生。我们运用蛋白质组学探讨补阳还五汤促脑缺血大鼠或低氧损伤神经干细胞后神经再生的机理,提取蛋白质后双向电泳展示,以 Mascot Distiller软件软件对2-DE 图谱进行差异表达分析,目标蛋白点用基质辅助激光解析电离质谱测定肽质量指纹图进行鉴定,发现正常组、模型组、中药组动物14d分别分离出蛋白质点745、728和768个,其中差异蛋白32个,26个蛋白点下调,6个蛋白质表达上调,正常组、模型组、中药组细胞7d分别分离出蛋白质点545、553和551个,其中差异蛋白20个,23个蛋白点下调,7个蛋白质表达上调,补阳还五汤能不同程度回调蛋白表达。选择差异明显的蛋白质bFGF和Nogo-A运用免疫组化、RT-PCR在缺血大鼠进行验证,发现脑缺血后bFGF表达下降而Nogo-A及其受体表达升高,补阳还五汤能增强bFGF表达、抑制Nogo-A升高,表明bFGF和Nogo-A为神经再生的调节蛋白。