本项目以重要的储粮害虫嗜虫书虱为研究对象,研究其信息素的主要成分和释放的节律。利用目前已经发表的鳞翅目和其他目昆虫的pyrokinin/PBAN多肽的保守的氨基酸序列设计多对引物,利用RT-PCR和嵌套式3‘RACE的方法进行嗜虫书虱雌虫的Pyrokinin/PBAN基因的克隆。发现利用多种方法克隆的基因均不是Pyrokinin/PBAN基因。利用Hez-PBAN(24-33)多肽为抗原进行抗体的制作,然后利用竞争性的ELISA方法验证了嗜虫书虱雌虫的头部提取物中含有Pyrokinin/PBAN多肽,并利用反相的HPLC分离和纯化Pyrokinin/PBAN多肽。然后利用MAIDI-TOF-MS方法测定了嗜虫书虱雌虫的头部Pyrokinin/PBAN多肽的序列为SAGMPFTPRL-NH2。通过NCBI序列对比发现该多肽和目前发表的Pyrokinin/PBAN的多肽序列均存在的C端的FXPRL的同源序列,说明该昆虫体内存在Pyrokinin/PBAN多肽。该研究为利用非肽类组分和设计具有激活或抑制作用的PBAN类似物进行害虫防治,为安全和绿色储粮提供新的思路。
英文主题词Liposcelis entomophila; sex pheromone; Pyrokinin/PBAN; competitive ELISA; methods of MAIDI-TOF-MS