中文摘要：

关于雌激素导致子宫内膜癌的发病机制研究很多，但关于孕激素保守治疗子宫内膜癌使其逆转属于探索治疗阶段，孕激素具体作用机制尚不明确。本研究用孕激素处理两种不同的子宫内膜癌Ishikawa 和LIE-EC细胞，观察细胞增殖和凋亡的不同及其AKT表达差异，尝试从AKT途径探究孕激素治疗子宫内膜癌的作用机制；研究还将采用分子生物学方法检测孕激素处理后的两种子宫内膜癌细胞不同作用结果下EGFR-mRNA水平（RT-PCR），p16基因缺失及突变型p53基因的表达情况（PCR），寻找可能预测孕激素作用效果的标志物；本研究还将分别通过体外（细胞培养）和体内（裸鼠成瘤）实验探究AKT抑制剂作为孕激素对子宫内膜癌作用增效剂的可能。本研究是妇科恶性肿瘤保留生育功能治疗领域较为前沿的基础研究，有利于揭示孕激素治疗子宫内膜癌的作用机制，并为寻找预测孕激素作用效果的标志物和孕激素作用效果的增效剂提供实验依据。

结论摘要：

本课题研究了孕激素对子宫内膜癌Ishikawa细胞和孕激素耐药Ishikawa细胞PI3K/Akt信号通路的影响，探讨了孕激素治疗子宫内膜癌的机制。课题对子宫内膜癌Ishikawa细胞和孕激素耐药Ishikawa细胞体外培养后进行了细胞分型鉴定，结果提示Ishikawa细胞保留了I型内膜癌的主要特征。孕激素耐药Ishikawa细胞雌、孕激素受体表达下调；不同浓度醋酸甲地孕酮作用于两株细胞，根据细胞增殖变化及凋亡情况确定了孕激素最佳作用浓度和时间。以最佳浓度作用于两株细胞后检测了两株细胞通路蛋白表达情况。结果提示醋酸甲地孕酮可抑制Ishikawa细胞PI3K/Akt通路，而激活孕激素耐药Ishikawa细胞的PI3K/Akt通路。本课题研究了PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235对子宫内膜癌Ishikawa细胞及孕激素耐药Ishikawa细胞体外增殖能力的抑制作用，NVP-BEZ235和醋酸甲地孕酮联合应用对两株细胞Akt蛋白磷酸化水平的影响。探讨NVP-BEZ235能否增强孕激素对Ishikawa细胞的抑制作用，能否改善或逆转孕激素耐药Ishikawa细胞的耐药性。研究发现NVP-BEZ235可有效抑制Ishikawa细胞体外增殖，增加其对孕激素的敏感性。可抑制孕激素耐药Ishikawa细胞体外增殖，并能逆转其对孕激素的耐药性。NVP-BEZ235和醋酸甲地孕酮联合用药可降调节Ishikawa细胞Akt磷酸化水平，NVP-BEZ235可有效抑制醋酸甲地孕酮介导的孕激素耐药Ishikawa细胞的Akt磷酸化水平的上调，进而降调节孕激素耐药Ishikawa细胞Akt的磷酸化水平。本课题尚研究了体内情况下NVP-BEZ235对于孕激素治疗裸鼠子宫内膜癌的影响。将孕激素耐药Ishikawa细胞接种裸鼠成瘤后，对照组仅喂食孕激素观察肿瘤消退效果；实验组采用NVP-BEZ235预处理后再喂食孕激素观察肿瘤消退情况并与对照组进行对比。结果提示NVP-BEZ235单药及联合醋酸甲地孕酮对肿瘤抑制效应较醋酸甲地孕酮单药更为明显。