中药材含有多种化学结构类型、活性强度不同的活性成分,单纯用化学成分定性、定量分析和指纹图谱技术,或者生物活性指标均难以"有效地"评价中药材的质量。为此,提出一种将活性成分含量与活性强度相结合,用"活性指数"评价中药材质量的新模式。当归是中医最常用的补血药,具有补血活血、调经止痛和润肠通便的功能。本项目拟针对其主要功效- - 补血活性,建立"补血活性指数"评价当归药材补血活性的新方法,以便对这一新模式进行示范研究。当归经提取、分离成不同的化学部位,用小鼠血虚模型定量评价各化学部位的补血活性,测定药材中具有补血活性的各化学部位的含量,再将各补血活性部位在药材中的含量与其活性强度综合计算出药材的补血活性指数,以此表示该药材补血活性的强弱。用此方法评价中、日、韩国和欧洲"当归类"药材之间的补血活性,既验证方法的可行性,又揭示它们之间补血活性的差异,也有利于明确药材品种、化学成分与补血活性之间的相关性。
Angelica;Levisticum;Enrich-blood Bioactive Index;Quality assessement;Tonifying Blood
中药材的质量直接影响中药饮片、中成药及其相关产品的质量和功效。在当今单独用化学成分定性、定量分析和指纹图谱技术,或者生物活性指标均难以“有效”评价中药材质量的情况下,本项目组提出了将活性成分的含量与活性强度相结合,用“活性指数”定量表示中药材生物活性的强弱,进而评价其质量优劣的新模式。本项目以常用的补血药—当归为研究对象,针对其补血活性进行了探索研究。首先,通过对当归化学部位提取分离及其补血活性的比较,小鼠血虚模型的建立,阳性药物(环孢素A)的筛选,补血活性指标(红细胞)的选择,补血活性定性判别及定量测定等方法的优化,建立了测定当归药材“补血活性指数”的方法。其次,测定了中国当归、日本当归、韩国当归、欧当归和Angelica root五种“当归类”药材25份样品的补血活性。结果表明(1)中国当归的补血活性(补血活性指数为27.976,n = 9)> 韩国当归(15.334,n = 4)> Lovage root(欧当归)(14.897,n = 4)>日本当归(7.664,n = 5)。而Angelica root未检测出补血活性。并且,中国当归与日本当归、韩国当归和欧当归之间的补血活性指数有极显著差异(P < 0.01);说明中国当归的补血活性显著强于其他“当归类”药材。(2)初步建立了中国当归与非中国当归的Fisher判别函数。判别为中国当归的符合率是66.7%,非中国当归的符合率达100%。(3)大、中、小当归药材的补血活性不同;药材越大,补血活性指数越大,补血活性越强。(4)不同产地、不同贮藏期样品的补血活性不同。第三,对25份药材样品行了HPLC指纹图谱和红外光谱分析;并测定了活性成分藁本内酯和多糖的含量。结果表明,HPLC指纹图谱、红外光谱以及藁本内酯和多糖含量均可用于药材鉴别。发现品种与化学成分,品种与补血活性有关,但未发现化学成分与补血活性之间的直接关系。此外,对中国当归粉末与不同化学部位之间补血活性的比较结果表明化学成分越多的样品,补血活性越强。说明当归的补血活性是多种化学成分的协同作用。药材提取物的提取率与其补血活性相关,相关系数大于0.58 (n = 22)。由此可见,“补血活性指数”准确地指示了“当归类”药材的补血活性及其质量,为这些药材的合理应用提供了科学依据。本项目为用“活性指数”评价中药材的质量提供了科学的研究方法和示范。