中文摘要：

利用基因工程技术构建我国主要致敏花粉-葎草花粉cDNA表达文库；采取Western blot法，用经葎草花粉变应原免疫小鼠产生的葎草花粉特异性抗体及葎草花粉过敏患者的阳性血清筛选主要变应原阳性克隆；利用原核基因工程技术诱导葎草花粉主要变应原阳性克隆表达变应原；采取免疫印迹法，分析重组葎草花粉变应原的免疫学特性，将其分类为具有变应原特性及具有免疫原特性的重组葎草花粉变应原，可代替粗制葎草花粉变应原分别用于变态反应疾病的病因学诊断及特异性免疫治疗（SIT）。本研究内容是国内外变应原研究的热点，是分子生物学技术在变态反应学领域中的重要应用，将为研究葎草花粉变应原致敏机理，提高葎草花粉过敏性疾病诊断的特异性，SIT的安全性及葎草花粉分子疫苗的制备奠定基础。

结论摘要：

研究背景变态反应疾病的特异性诊断和免疫治疗依赖于高质量、纯化的标准化变应原，既往应用的变应原提取液成分复杂，其效价及组分难以标准化，降低了诊断的特异性和治疗的安全性，使其应用受到限制。研究表明，通过基因工程技术获得的标准化重组变应原具有与天然变应原提取液几乎完全相同的变应原性和免疫原性，能取代传统的天然变应原浸液用于变态反应病的诊断和特异性免疫治疗。我们对西安地区气传致敏花粉调查研究发现葎草花粉是西北地区最主要的气传致敏原之一。方向构建葎cDNA表达文库，筛选阳性克隆并分析cDNA片段。方法制备兔抗葎草花粉多克隆免疫血清；分析葎草花粉变应原提取液的免疫学特性；构建葎草花粉cDNA表达文库，筛选阳性克隆，并测序、分析阳性cDNA片段的基因序列。结果成功构建了一个含有5 х105重组子的葎草花粉表达文库，筛选出3个阳性克隆，PCR扩增阳性克隆cDNA片段提示基因片段大小在900-2500之间，序列分析显示均为新发现的基因片段。科学意义成功筛选葎草花粉主要变应原克隆，为葎草花粉过敏患者的特异性诊断与免疫治疗提供高纯度的特异性变应原，为制备标准化葎草花粉变应原疫苗奠定基础。