中文摘要：

在猪的产科问题中死胎、弱仔和胚胎死亡的现象十分普遍，约30％-40％的胚胎在发育过程中死亡。胎盘血管发生不足是导致胚胎死亡或胎儿发育迟缓的重要原因。研究发现，过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）对鼠和人胎盘发育及胎盘血管发生具有重要影响，其缺失可导致小鼠胚胎在9.5～11.5天间死亡。这提示PPARγ也可能对猪的胎盘及胎盘血管的发生产生影响。本项目将主要采用在体和离体的PPARγ激活或抑制实验，结合现代细胞分子生物技术与病理学检查手段，探索PPARγ对猪胎盘发育的组织结构及血管发生的影响，分析PPARγ对血管发生相关因子VECF、Prl2c2 (PLF)和Prl7d1 (PRP)表达影响及其机理，并探讨PPARγ与猪胎儿发育迟缓的关联性，为防制妊娠过程中猪胚胎或胎儿死亡提供新的科学依据和理论。

结论摘要：

在母猪生产中死胎、弱仔和胚胎死亡的现象十分普遍，有30%-40%的胚胎在发育过程中死亡。胎盘血管发生不足是导致胚胎死亡或胎儿发育迟缓的重要原因。研究发现，过氧化物酶体增殖物激活受体gamma（PPARγ）对鼠和人胎盘发育及胎盘血管发生具有重要影响，提示PPARγ可能对猪的胎盘及胎盘血管的发生产生影响。本项目选择妊娠期（GD）25、40和70天母猪和猪脐静脉血管内皮细胞为研究对象，采用现代细胞分子生物技术与组织病理学检查手段，主要研究了母胎界面PPARγ表达水平、趋势与胎盘血管密度的相关性及其对胎儿发育的影响，研究了体外PPARγ对血管形成的影响以及其机理。通过检测GD 25、40和70子宫、胎囊和胎儿长度、胎儿的重量、胎盘血管密度和PPARγ 表达水平，发现PPARγ在猪胎盘中存在表达，表达水平随妊娠进展呈现先升高后降低的趋势，主要分布在子宫腺体细胞、滋养层细胞、血管内皮细胞和羊膜绒毛膜上皮细胞；GD 25和40的胎囊大小差异与胎儿发育不相关，但是GD 70胎儿发育的个体差异性（体长、体重）增大，胎囊或胎盘的发育与胎儿的发育呈现正相关性；GD 25、40、70和分娩胎盘 PPARγ的表达水平与胚胎存活状态呈现正相关性；通过对胎盘中PPARγ编码序列的克隆、序列分析和原核表达发现，胎盘中只存在PPARγ1，在配体结合区与卵巢和脂肪细胞来源PPARγ1分别存在1个和2个氨基酸残基差异，可能与组织功能差异性相关。通过iCELLigence系统监测内皮细胞贴壁、增殖，发现PPARγ与猪脐静脉血管内皮细胞贴壁、增殖成正相关性；伤痕实验监测内皮细胞迁移，发现PPARγ与猪脐静脉血管内皮细胞迁移成正相关性；毛细管样结构形成实验监测体外血管形成，发现 PPARγ对猪脐静脉血管内皮细胞功能及血管形成的具有促进作用，有利于血管形成和稳定；通过应用pIC-neo表达系统和CRSPR/Cas9敲除系统，分别在血管内皮细胞中进行PPARγ过表达和PPARγ敲除，同样获得与此相一致的结果。最后，基于猪血管内皮细胞配体干预、PPARγ过表达和PPARγ敲除细胞模型，检测了低氧诱导因子-血管内皮细胞生长因子（HIFs-VEGFA）信号通路重要信息分子的变化，证实了PPARγ通过与HIFs相互作用，调节PlGF和VEGF的表达量和亚型，促进Flt和和KDR的表达，实现对猪胎盘血管发生的调控。