中文摘要：

肝细胞核因子3（Hepatocyte nuclear factor 3，HNF3）是肝富集转录因子的一种，是HBV基因转录的重要调控因子之一。研究显示，HNF3对HBV复制具有抑制作用。本项目拟通过基因突变的方法，构建一系列带有HNF3结合位点突变的复制型HBV重组质粒，以及HBsAg,HBeAg或HBxAg表达缺失的HBV重组质粒。通过比较HNF3对野生型和突变型HBV转录和复制的抑制作用的差异，阐明HNF3是否是通过HBV基因组上的HNF3结合位点，来实现其抑制HBV复制的功能，以及HNF3的抑制作用是否与病毒蛋白产物相关。阐明肝富集转录因子HNF3抑制HBV复制的作用机理及作用位点，不仅有助于阐明HBV致病的分子机理，而且可为抗-HBV治疗提供可能的作用靶点。

结论摘要：

HBV（乙肝病毒）感染具有嗜肝性，其机理可能涉及宿主因子在HBV基因转录复制水平的双向调控。 HNF3β是宿主细胞肝富集转录因子HNF3家族的成员，能抑制HBV的转录和复制。本项目研究其作用机理是否涉及HBV基因组上的某几个HNF3结合位点。通过分别位于HBV基因组的多聚酶编码区P 、PS1p和Sp区上的HNF3结合位点，构建HBV基因组两个或三个位点的复合突变，获得四个复合突变型重组质粒；分别转染非肝源性细胞NIH3T3后，用Northern吸印杂交检测3.5kb, 2.4/2.1kb, 0.7kb HBV RNA的转录水平，Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平，结果观察到在被转染的非肝源性细胞3T3细胞中， HNF3β仍能降低四个复合突变型HBV重组质粒3.5kb HBV RNA的转录水平，抑制HBV DNA的复制。 上述结果表明HNF3β对HBV转录和复制的抑制作用，可能不是单纯通过该区上述位点的联合发挥作用；提示肝富集转录因子对乙肝病毒转录和复制调节的复杂性。