把生物传感器技术应用于基因重组发酵过程的在线监控,以毕赤酵母表达重组人白细胞介素-13为研究对象,运用顺序注射分析技术,完成样品的在线预处理,采用固定化酶-化学发光检测法实时测定发酵液中的关键底物甘油(细胞生长期)和甲醇(诱导期)的浓度,同时采用非均相免疫荧光分析法测定目的蛋白,根据获得的上述参数,并结合发酵液的温度、溶解氧、细胞密度等参数,控制甘油、甲醇的流加速度,优化该发酵体系,获得稳定、可控
本项目运用固定化酶-化学发光法和顺序注射分析技术,以毕赤酵母表达重组人白细胞介素-13为研究对象,建立了一套在线监测发酵液中关键底物甲醇和甘油的自动分析系统。采用微型固定化酶柱,待测组分经相应的酶柱后产生的过氧化氢由化学发光检测器测定,从而获得甘油和甲醇的实时浓度。该系统分析速度快、试样试剂消耗少,过滤、稀释、测定过程在线自动完成,由于采取相同的化学发光检测手段,通过顺序注射的不同阀位及不同的固定化酶柱,即可在同一仪器上完成甘油和甲醇的在线分析,设备简单可靠,长期稳定性好,可推广应用于微生物发酵过程等的在线监控。采用简单设备进行基因重组表达过程中关键底物的监测目前尚未见报道。该项目的成果在环境分析、过程分析等领域亦有广泛的应用前景。