中文摘要：

我国肝癌高发,存在治疗难,预后差等难题。近年来,射频消融（RFA）因创伤小、易操作、疗效显著等优点，受到临床重视。然而，单纯RFA治疗大肝癌疗效欠佳，治疗后复发率高，联合治疗成为提高疗效的关键。我们前期的动物实验发现，脂质体阿霉素可激活RFA边界处肿瘤细胞的凋亡通路，增加坏死范围。更有意义的是，高表达热休克蛋白(hsp70)环状分布于细胞凋亡区域外周,提示热休克蛋白可能阻止凋亡范围的进一步扩大。由此假设药物增强细胞凋亡或抑制热休克蛋白均可增加RFA的治疗范围，提高疗效。本研究拟在1. 利用肿瘤动物模型比较凋亡诱导剂或热休克蛋白抑制剂（阿霉素，紫杉醇，槲皮素）对RFA疗效的影响，体内及体外试验进一步探讨相互作用的分子机制及相关的信号通路；同时应用蛋白质谱分析寻找新的药物作用靶点。 2.筛选有效联合方案，应用于临床研究，验证疗效。旨在探讨热消融与抗肿瘤药物相结和的联合治疗机制和临床应用前景。

结论摘要：

由于肝肿瘤的形成为多因素性，目前，射频消融（RFA）联合治疗已成为提高疗效的重要方向。由于大量抗肿瘤药物及新型药物传递系统的迅速研发和应用，为RFA联合治疗提供新的治疗模式。 本研究根据早期研究发现的机制，选择临床可行的脂质体抗肿瘤药物进行联合RFA治疗的动物实验及细胞体外试验，检验联合治疗的效果及进一步探讨作用机制及相关通路，同时寻找改善RFA疗效的新靶点。研究结果显示静脉注射脂质体热休克蛋白抑制剂（quercetin）联合RFA，可增加肿瘤破坏范围并改善动物终点生存率。增加其它脂质体抗肿瘤药物doxorubicin可以通过不同机制协同作用，进一步提高生存率。根据体内，体外系列实验表明，quercetin治疗可有效抑制热休克蛋白转录因子HSF1，通过AP-1及NF-KB通路调控，减少热休克蛋白及增加细胞凋亡，可显著改善RFA治疗实体肿瘤疗效。应用热敏脂质体载药研究显示，热敏脂质体药物较游离药物在肿瘤内沉积显著增加，瘤内浓度为后者的9.9倍。RFA本身也促进了药物在肿瘤内沉积，RFA后药物浓度是未RFA及游离药物组的 12.7倍。病理染色显示单纯RFA组消融区边缘坏死及变性细胞与正常肝组织交叉，界限不清。而联合治疗组消融区边缘变性细胞减少，与正常组织分界更清晰。提示热敏脂质体药物在瘤内浓度较高，有助于促进消融边缘区变性细胞的进一步坏死，扩大治疗范围。生存期研究进一步证实，热敏脂质体药物+RFA的平均终点生存期最长(33.0 ± 11.5天)，优于游离药物+RFA(23.3 ± 1.2天，P<0.05), 或单纯RFA组(21.7 ± 3.9天, P<0.05)。结合国际新进展，2013年增加射频消融联合iRGD靶向载药热敏脂质体抗肿瘤的研究。iRGD具有靶向肿瘤血管内皮细胞整合素受体及加速药物肿瘤内递送等功能。初步研究证实iRGD显著增加了抗肿瘤药物在血管周围的弥散及摄取，与RFA协同作用，进一步提高治疗后生存期。