中文摘要：

为寻求有效的结核分枝杆菌差异抗原，研究差异抗原的免疫原性，并借助寄生人类口腔非致病性粘膜共生菌-戈登氏链球菌表达差异抗原，以期宿主获得终身免疫。课题采用抑制性消减杂交技术对结核分枝杆菌H37Rv与H37Ra差异基因进行筛选，共得到11个在强毒株H37Rv中高表达的差异基因。选择差异基因片段ESAT-6借助质粒载体表达于戈登氏链球菌，并实现了ESAT-6蛋白的外泌表达。通过差异性抗原的免疫性的研究，表明Ag85A基因DNA疫苗能显著诱导的小鼠免疫应答，hlL-12表达质粒能够增强DNA疫苗的效能；ESAT-6激活的人外周血γδT细胞具有抗原提呈细胞的表型和抗原提呈作用；活的结核分支杆菌H37Ra有可能作为新的结核候选疫苗；同时制备了具有表达目的基因Ag85A的免疫活性的人外周血单核细胞。本研究首次实现了戈登链球菌表达结核分枝杆菌的基因片段，为结核疫苗的活菌疫苗做了有益的探索；肯定了结核的DNA疫苗联合细胞因子的免疫效能，首次研究了ESAT-6对γδT细胞的抗原表型和抗原提呈的正向作用；制备的具有结核免疫活性的人外周血单核细胞使结核的过继免疫治疗成为可能。