KCNJ5基因编码G蛋白偶联的内向整流型钾离子通道亚型4(GIRK4),其突变可导致醛固酮分泌瘤的发生。新疆高血压研究所对醛固酮分泌瘤组织进行该基因测序发现了新的突变率高达100%的X2位点,而该突变位点引起的通道功能改变,及其是否参与肾上腺球状带醛固酮分泌和细胞增殖的发生机制尚需进一步研究。本课题拟利用分子克隆技术构建含KCNJ5 X2突变型重组体并稳定转染至NCI-H295R细胞,通过细胞外应用不同类型通道阻断剂并运用RT-RCR技术、MTT法、EdU法等推测突变引起的通道功能改变;利用磷酸化标签(Phos-tag)检测突变型GIRK4的磷酸化水平,从而验证该突变是否参与促进醛固酮分泌和细胞增殖。
英文主题词aldosterone- producing adenomas;KCNJ5;cell proliferation;Akt;